absztrakt
Megvizsgáltuk a lítium és pilokarpin által kiváltott status epilepticus (SE) kezelés hatásait a születés utáni 15. napon (P15) vagy a 28. (P28) napon az akut SE és SE okozta epileptogenezis súlyosságára. A patkányok topiramátot (10 vagy 50 mg/kg, IP) vagy diazepámot (5 mg/kg, IP) kaptak 20, 40 vagy 70 perccel a pilokarpin után, és három hónappal az SE 24 órás EEG/EEG videó felvételei után (P28). ) vagy két hétig (P15) folyamatosan.
P15 patkányokban a topiramát nem módosította az SE lefolyását, de a 20 vagy 40 perces kezelés teljesen megakadályozta a spontán visszatérő rohamok (SRS) megjelenését, míg a későbbi kezelés (70 perc) részben hatékonyan csökkentette az SRS súlyosságát és gyakoriságát . A diazepám minden vizsgált időpontban hatásos volt az akut SE ellen. A korai (20 perces), de nem késői diazepám-kezelés az SRS gyakoriságának és súlyosságának csökkenését eredményezte.
P28 patkányokban mindkét gyógyszer csökkentette a kumulatív roham idejét. Bármelyik gyógyszerrel történő korai kezelés (20 perc) csökkentette a krónikus epilepszia előfordulását. Késői kezelés (40/70 perc) Nem változtatja meg az SRS előfordulását, de csökkenti azok gyakoriságát. Ez a tanulmány azt mutatja, hogy az SE kezelésében az antikonvulzív és antiepileptogén hatások fejlődési specifikus módon disszociálhatók: a topiramát antiepileptogén volt, anélkül, hogy a tesztelt dózisokban hatékony görcsoldó lenne P15 állatokban. A diazepam viszont jobb tesztgörcsölő volt, mint az antiepileptogén P15 állatokban a vizsgált dózis mellett. Ilyen hatásokat idősebb állatoknál nem figyeltek meg.
A fő
A status epilepticus (SE) gyakori neurológiai állapot. Az SE gyakori csecsemőknél és kisgyermekeknél, az SE esetek több mint 50% -a 2 évesnél fiatalabb (1, 2).
Az SE az epilepszia kialakulásának fokozott kockázatával jár. Az SE-t kialakító gyermekek 30% -ában később epilepszia alakult ki (3). A közelmúltban az akut tüneti SE-ben szenvedő betegek 41% -ánál (a gyermekek egyharmada) epilepszia alakult ki a következő 10 évben (4).
Az SE által kiváltott epileptogenezis felnőtt állatokban gyakori, és jelentős kísérleti bizonyítékok vannak arra, hogy az éretlen agyban előforduljon (5–9).
A görcsoldók klinikai kiválasztása hagyományosan azon alapul, hogy képesek blokkolni a rohamok kifejeződését, de a közelmúltban elérhető számos új molekuláris célpontot megcélzó epilepszia elleni gyógyszerek (AED) (10) felkeltették az érdeklődést az antiepileptogén hatásuk (pl. Az epilepszia csökkentése) tanulmányozása iránt. ) vagy a betegség módosítása (pl. az epilepszia súlyosságának csökkenése). Korlátozott kísérleteket végeztek a meglévő görcsoldók antiepileptogén potenciáljának vizsgálatára. Az emberek krónikus kezelése fenitoinral vagy valproinsavval a poszttraumás epilepszia megelőzésére nem volt sikeres (11, 12). Bár néhány állatkísérlet krónikus kábítószer-kezelést alkalmazott az SE utáni látens periódusban az epilepszia kialakulásának megakadályozására, kevésnek volt pozitív eredménye (13–16). Másrészt az SE akut kezelése felnőtt patkányokban időnként megelőzheti vagy csökkentheti a krónikus epilepszia súlyosságát. (16–19), de a görcsoldók hatását az epileptogenezisre éretlen állatoknál nem vizsgálták.
Megvizsgáltuk a topiramát vagy a diazepám hatékonyságát a lítium/pilokarpin SE akut kezelésében a patkány agyfejlődésének két különböző szakaszában: posztnatális 15. napon (P15) és postnatalis 28. napon (P28). Ezek a korosztályok nagyjából megfelelnek a gyermekkor és a serdülőkort megelőző gyermekkornak (20). Teszteltük az akut kezelés rövid távú (SE súlyossága) és hosszú távú funkcionális kimenetelre gyakorolt hatását (antiepileptogén vagy betegséget módosító hatás).
mód
Az állatok.
15 vagy 28 napos hím Wistar albínó patkányokat (Simonsen Lab, Gilroy, Kalifornia) használtunk (P15 és P28). A születés napját 0. napnak tekintették. A kölyökkutyákat a P21-nél választották el.
Valamennyi állatot egy hőmérséklet és páratartalom szabályozott helyiségben helyeztük el, 12 órás fény- és sötét ciklusokkal (a fényciklus reggel 7 órakor kezdődik), és szabadon hozzáférhettek élelemhez és vízhez. Valamennyi kísérletet az Állatok Gondozásával és Felhasználásával foglalkozó Intézményi Bizottság beleegyezésével és előírásaival összhangban hajtották végre a West Los Angeles VA Medical Center-ben.
Elektróda beültetés.
Az állatokat halotánnal altattuk. Ezután a tripoláris elektródát a koponyacsavarokhoz rögzítették (az első kettőt a jobb és a bal elülső kéreg fölött a koponyába helyezték, a harmadikat a kisagy fölé helyezték) és fogcementtel rögzítették. Az első két vezeték rögzítette az EEG-t a félgömbökön; a harmadikat vették alapul. A műtét után az állatokat egy megfigyelő kamrába helyeztük egy hőmérséklet-betéten, amíg meg nem gyógyultak. A P15 patkány kölykei gyógyulás után visszatértek anyjukhoz.
SE indukció és vivőanyag-beadás: diazepam vagy topiramát és/vagy atropin.
A lítiumot (3 mg/kg) intraperitoneálisan adtuk be a műtét napján, és 20 órával később sc-pilokarpinnal (60 mg/kg) indukáltuk az SE-t. A pilokarpin dózisát Sankar (5) határozta meg a vizsgálatunkban használt korcsoportok számára. Mértük az első ictalis aktivitás kezdetét és a folyamatos poliszpike aktivitást. A kontroll csoportot a pilokarpin után 70 perccel kezeltük vivőanyaggal és atropinnal olyan mennyiségben, amely elegendő a pilokarpin hatásainak nagy részének blokkolásához (10 mg/kg). Ennek eredményeként, ha a kezelés eredményes volt, az eredeti kolinomimetikum, amely az SE indukciójához vezetett, már nem volt képes újraindítani a rohamokat. Más csoportokban topiramátot (10 vagy 50 mg/kg, 10% DMSO-ban oldva) vagy diazepamot (5 mg/kg) intraperitoneálisan adtunk atropin-szulfáttal (10 mg/kg), 20, 40 vagy 70 perccel az alkalmazás után. pilokarpin. A DMSO-ban vagy sóoldatban oldott atropin hasonló hatással volt az SE súlyosságára; a két csoport összekapcsolódott. A "nem SE" kontrollcsoport csak lítiumot és vivőanyagot kapott. Valamennyi állatot sóoldattal rehidráltuk körülbelül 5 órával az SE után (10% testtömeg, sc). A testtömeget naponta 10 napon keresztül ellenőriztük SE után.
Akut video-EEG monitorozás.
Haas (21) módosított skáláját alkalmaztuk: 0) viselkedési letartóztatás; 1) orális lezárás; 2) a fej ringatása; 3) fejrög), 4) a klón kétoldali első végtagjai; 5) klónozás tenyésztéssel és eséssel; 6) vad futás és ugrás hanggal; 7) hang.
Krónikus video-EEG monitorozás.
Statisztikai analízis.
Az akut kísérletek mindegyik csoportja legalább öt állatból állt, a krónikus kísérletekhez pedig minden csoport legalább hat állatból állt. Akut kísérletek esetében statisztikai összehasonlításokat végeztünk varianciaanalízissel többszörös összehasonlítás céljából a Bonferroni post hoc teszttel a paraméteres és Dunn poszt hoc tesztjeivel a nemparametrikus adatokra. A krónikus adatokhoz tervezett összehasonlításokat végeztek a Bonferroni-korrekcióval és a korrelációkkal. Valamennyi tesztet statisztikai szoftverrel (Sigmastat, Jandel Scientific) végeztük. P értékek
A topiramáttal (10 mg/kg) vagy a diazepammal (70 perccel a pilokarpin után adva) történő kezelés hatása a lítium/pilokarpin SE súlyosságára P15 patkányokban. (A) A topiramát, a diazepám és/vagy az atropin görcsrohamra gyakorolt hatásának időbeli lefolyása (rohamidő az interiktális idő számlálásával) atropin (•); topiramát + atropin (○); diazepam + atropin (▴) (B) P15 patkányok koponyaelektródáiból rögzített reprezentatív EEG, amelyet topiramát, diazepám és/vagy atropin injektálása után 25 perc és 2 óra elteltével gyűjtöttünk össze. Az értékek eszközök.
Teljes méretű kép
Az 5 mg/kg diazepámmal végzett kezelés azonnal elnyomta a viselkedési rohamokat, lerövidítette a folyamatos polyspike aktivitást, csökkentette a kumulatív rohamok idejét és a teljes rohamok idejét, az SE időtartamát és a rohamok számát a tesztelt összes időpontban (1. táblázat; 1. ábra, A, B).,
A kezelés hatása az epileptogenezisre.
3 nappal az SE után tesztelve az atropin állatok 75% -ánál SRS mutatott átlagos roham pontszámot 1,6 ± 0,6 . Az átlagos rohamfrekvencia 1,4 ± 1,1 roham/d volt, átlagos rohamidőtartama 12, 8 ± 4, 9.
Korai kezelés topiramáttal (10 mg/kg) (20 vagy 40 percnél) teljesen védett és késői kezelés (70 percnél) részben védett az SRS kialakulása ellen (1/7 patkánynak 1 izolált, nem görcsös rohama volt) (2. táblázat, 2. ábra A, B). A topiramát jelentősen csökkentette a tüskék gyakoriságát az atropin csoporthoz képest (2. táblázat).
Asztal teljes méretben
(A) Akut vs. topiramáttal (10 mg/kg) vagy diazepámmal végzett akut kezelés krónikus eredménye 20, 40 vagy 70 perccel a pilokarpin után P15 patkányokban. A topiramát nem csökkentette a rohamok halmozott idejét, de blokkolta az SRS kialakulását. A diazepám csökkentette a kumulatív rohamokat, és nem akadályozta meg az SRS, az atropin (.) Kialakulását; topiramát + atropin (□); diazepam + atropin (□). (B) A csak diazepámmal végzett korai kezelés (20 perc) csökkentette az SRS gyakoriságát. * o
A pilokarpin után 20, 40 vagy 70 perccel beadott topiramát (10 mg/kg) kezelés hatása a lítium/pilokarpin SE súlyosságára P28 patkányokban. (A) A pilokarpin 20, 40 vagy 70 perccel beadott topiramát-kezelés (10 mg/kg) időfüggő hatása az SE rohamok aktivitására P28 patkányokban, atropin (•); 20 perc topiramát + atropin (○); 40 perc topiramát + atropin (□); 70 perc topiramát + atropin (▪). (B) A topiramát- és/vagy atropin-kezelés után 90 perccel készített reprezentatív EEG-felvételek. A topiramát állat és az atropin 70 perces kontrolljában folyamatos poliszpike aktivitás fennmaradt, míg a topiramát állat 20 vagy 40 perces kontrolljában egyetlen csúcs aktivitás következett be. Az értékek eszközök.
Teljes méretű kép
A diazepám minden vizsgált időpontban elnyomta a viselkedési rohamokat, lerövidítette a folyamatos poliszpike aktivitást és csökkentette a kumulatív rohamok idejét (1. táblázat).
A kezelés hatása az epileptogenezisre.
3 hónappal később rögzítve az atropin kontroll állatok 92% -ánál alakult ki SRS, átlagos roham súlyossága 2,8 ± 0,6, és az állatok 69% -ánál alakultak ki rohamok (3-5. Stádium). A rohamok átlagos gyakorisága 17,5 ± 5,1 roham/d volt, az átlagos roham időtartama 26,9 ± 7,3 s.
A topiramát (10 mg/kg) vagy a diazepam (5 mg/kg) korai kezelése csökkentette a rohamok gyakoriságát (2. táblázat, 4B. Ábra) és jelentősen csökkentette a krónikus epilepszia előfordulását (2. táblázat): 17% mindkét csoportban 92-ig az atropin kontrollokban. A késői kezelés (40 és 70 perc) nem változtatja meg a krónikus visszatérő rohamok előfordulását, de csökkenti azok gyakoriságát (2. táblázat, 4B. Ábra). A topiramát hatékonyabban csökkentette az akut SE súlyosságát P28 patkányokban, összehasonlítva a P15 patkányokkal, de az SRS csökkenése sokkal nagyobb volt a fiatalabb csoportban (4A. Ábra).
(A) Akut vs. topiramáttal (10 mg/kg) végzett akut kezelés krónikus eredménye 20, 40 vagy 70 perccel a pilokarpin után, P15-nél vagy P28 patkányokon. A topiramát jobb görcsoldó volt, ha P28 patkányoknak adták be; A topiramát antiepileptogén volt P15 patkányokban, (B) A topiramát (10 mg/kg) vagy a diazepam kezelés SE során P28 patkányokon az epileptogenezisre gyakorolt hatása, 3 hónappal később értékelve. A korai kezelés (20 perc) részben védett volt az SRS kialakulásától, és jelentősen csökkentette az SRS gyakoriságát. A késői kezelés (40 vagy 70 perc) csökkentette az SRS gyakoriságát (betegségmódosító hatás). * p P15, P28: