anya

Az ember a távoli múltban tisztában volt egyediségével és identitásával. A populáció egyedei megjelenésükben, morfológiai jellemzőikben különböznek egymástól. Különbözőek a végtagok magassága, mérete, hossza és alakja, a bőr színe, de a legegyedibb tulajdonságokat a fej arcának elemzésében találhatjuk meg. A morfológiai paraméterek mérése, azok megrajzolása és későbbi fényképezése hosszú ideig szolgált a személyek egyetlen azonosítójaként, például háborúk, balesetek vagy bűnügyi nyomozás után. Sajnos az egyének hasonlósága gyakran visszafordíthatatlan következményekkel járó hibákhoz vezetett. Számos téves ítéletet dokumentálnak, amelyek egy ártatlan ember és az elkövető hasonlóságán alapulnak.

A személyek azonosításának és a rokonság bemutatása

Nagy előrelépés volt a papilláris vonalak egyediségének felfedezése, amely hosszú évekig meghatározó tényezővé vált a megkérdőjelezhetetlen azonosítás szempontjából. A helyzet még nehezebb volt a rokonság meghatározásában. A vérrokonok papilláris vonalai nem mutatnak egyértelműen hasonló vonásokat, és e tekintetben kudarcot vallanak. A rokonság megállapításáról "szakértői" vélemények évtizedekkel ezelőtt készültek a vércsoportok öröklődésével kapcsolatos ismeretek alkalmazása, a fül, az orr, a szem színének, a szem távolságának stb. Mérése és leírása alapján. Érthető, hogy ebben a periódusban nagyszámú hiba történt a rokonság - különösen az apaság - meghatározásakor.

A polgári jog fejlődése, a vallási és erkölcsi szabályok enyhítése, de a katasztrófák és katonai konfliktusok után az emberek egyértelmű azonosítására tett erőfeszítések erőfeszítésekhez vezettek az emberek azonosítására és biológiai kapcsolatuk bizonyítására irányuló eljárások további javítására. Azonban továbbra is kerestek egy olyan jelzőt, amely abszolút egyedi a személy számára, és kiterjedt beavatkozások (betegség, a test mechanikai károsodása) után sem esik rombolásra. A HLA rendszer felfedezése jelentősen fejlett ismeretekkel rendelkezik az egyének azonosításában.

Rövid ismétlődő szekvenciák felfedezése

A polimeráz láncreakció felfedezése

Két évvel az STR felfedezése után a molekuláris genetika egy másik kivételes eszköz kezébe került. Mullis felfedezte a polimeráz láncreakciót - PCR-t, amely lehetővé teszi a DNS bármely szakaszának amplifikálását és láthatóvá tételét a további vizsgálatokhoz. A PCR-termékek kezdeti elemzését klasszikus elektroforézissel végeztük. Mivel az ujjlenyomatokhoz hasonlóan nagyszámú kombinációval készítettek mintákat, megkapták az "ujjlenyomat" nevet, amelyet ma is használnak (1. ábra).

Az első valós eset, amikor DNS-ujjlenyomatot használtak, két lány megerőszakolásának és meggyilkolásának bizonyítása volt Leicestershire-ben. A biológiai nyomokat Alec Jeffreys elemezte DNS-ujjlenyomat-módszerrel, és sikeresen összehasonlították a fogva tartott férfi biológiai mintáival, ami elítéléséhez vezetett. A volt Csehszlovákiában a DNS-elemzést 1990-ben alkalmazták először egy fiatal diák meggyilkolása esetén a brünni Masaryk Egyetemen, ahol egy valószínű gyilkos vércseppjeit foglalták le. Az úttörő szakértői véleményt, amely a bűncselekmény helyszínéről származó vért azonosította a gyanús férfival, doc. RNDr. Vladimír Ferák, a pozsonyi Károly Egyetem Genetikai és Molekuláris Kémiai Tanszékének vezetője, akivel a genetikai genealógiáról és az ősök kereséséről érdekes interjút közölünk ebben a számban a p. 32. Ennek a kivételes tudósnak a véleménye lehetővé tette Szlovákia történetében a legrosszabb sorozatgyilkos, Ondrej Riga őrizetbe vételét is.

Hogyan működik az apaság meghatározása?

Mint már említettük, az emberi genom változékonysága óriási. A mai napig nem találtak két olyan személyt, amely megfelelne a teljes DNS-szekvenciának. Ikreknél is feltételezhetjük, hogy az élet során létrejött mutációk miatt kis különbségek lehetnek közöttük. Míg az orvosi genetika főként az ún kódoló DNS-t, az igazságügyi genetika kizárólag a nem kódoló régiókra összpontosít - már említett STR polimorfizmusok.

Minden ismétlődő szekvencia párban van jelen a genomban. A pár egyik része az anyától, a másik az apától származik. Ha a szülőktől kapott és a kromoszómán ugyanazon helyen elhelyezkedő mindkét példány ismétlődésének száma nem azonos, akkor visszakövethetjük, hogy a szekvencia melyik szülőtől (nagyszülő, rokon) származik. Ilyen polimorfizmusokat alkalmazunk apasági vitákban és azonosításokban.

Íme néhány alapvető példa. A férfinak 16/16 ismétlése van tandemszerűen (apjától és anyjától egyaránt örökölt egy olyan szekvenciát, amely 16 ismétlést tartalmaz a bázisok bizonyos kombinációjával). A nőnek megvan az adott ismétlés elrendezése, például 15/15 (apa és anya azonos módon kerültek át hozzá az alapkombináció 15 ismétlése után). Az utódoknak apja és anyja kombinációját kell örökölniük, így csak 16/15 kombinációja lehet.

Kicsit bonyolultabb a helyzet, amikor az embernek például van egy 16/18 kombinációja. Spermája ezután a 16 ismétlés 50% -os és a 18 ismétlés 50% -os hordozója. Ha az anya hordozza a kombinációt 15/15, az utódok 50% -os valószínűséggel megismétlik a 16/15-öt, és 50% -kal a 18/15-ös valószínűséget.

Természetesen a tandem ismétlések, amelyek ismétléseinek száma apa és anya esetében egyaránt megegyezik, nem használhatók az apaság meghatározására. Tájékozatlannak nevezzük őket. Az apaság vagy az azonosítás DNS-elemzésében inkább azokat a tandemismétléseket alkalmazzuk, amelyeket tapasztalatból tudunk arról, hogy abban a populációban, ahonnan a tesztelt szülők származnak, ők a polimorfabbak (változatosak, különböző hosszúságúak). Az ilyen szekvenciákat informatívnak nevezzük.

Minél informatívabb szekvenciákat veszünk fel a tesztbe, annál pontosabb az eredmény. A tandem ismétlés (STR) elemzését lehetővé tevő kereskedelmi készletek ma nagy pontossággal működnek. A standard a multiplex PCR, amely 16 különböző fluoreszcensen jelölt lókusz STR-ét amplifikálja. Gyakorlatilag az STR-elemzés eredményének kudarcának és téves értelmezésének egyetlen lehetséges módja az utódok olyan mutációja, amely megváltoztatja az ismétlődő szekvenciát, hogy megfeleljen a tesztember szekvenciájának, még akkor is, ha valójában nem ő lenne az apa. De az ilyen összetévesztés valószínűsége elhanyagolható. Az STR rendszereket úgy tervezték, hogy a mutációk frekvenciája körülbelül 1: 1.000. A tesztember genomjának utánzására használt mind a 16 szekvencia egyszerre történő mutálásának lehetősége, még akkor is, ha ő nem apa, gyakorlatilag nulla.

A populációban két egyén közötti mérkőzés valószínűsége 10-17. Ha a kijelölt férfi apaságát nem zárják ki, kiszámíthatjuk százalékos valószínűségét. A 16 STR-lokusz vizsgálata az apaság valószínűségét meghaladja a 99,9999% -ot. Így genetikai elemzéssel a bizonyossággal határos valószínűséggel egy adott személyhez rendelhetünk biológiai anyagot.

Az Y-kromoszómán elhelyezkedő ismétlődő szekvenciák változatlanul öröklődnek kizárólag apáról fiúra egészében - az ún. haplotípus Y-STR. Ugyanez vonatkozik az apai vonalú férfiakra is. Az apa-fiú vonal rokonságának megerősítése ezért viszonylag egyszerű, még az anya DNS -ére sincs szükségünk.

Az Y kromoszóma női megfelelője a mitokondriális DNS. Ez a gyűrűs molekula a mitokondriumokban található, és érdekes az emberi azonosítás szempontjából is. A mitokondriális DNS az anyavonalból öröklődik az anyától az utódjáig (lányai és fiai). A mitokondriális DNS értékes információkat nyújthat a rokonság távoli fokáról. Használatának példamutató példája egy jekatyerinburgi tömegsírban található csontváz leletének elemzése, ahol II. Miklós orosz cár, a császárné és két lánya maradványait azonosították - összehasonlítva a mitokondriális DNS szekvenciáját élő rokonokkal. Egyikük II. Erzsébet jelenlegi brit királynő, Fülöp herceg férje volt.

Az apaság elemzéséhez megfelelő biológiai anyagot általában nem invazív módon - szájnyálkahártya segítségével - nyerik. A vér-, haj- és körömmintákat kisebb mértékben használják. A mintákat rendszeresen az anyától, a gyermektől és a kijelölt férfitól veszik, vagy csak a gyermektől és a kijelölt férfitól. Ha a valószínű apa elhunyt vagy eltűnt, és a kapcsolat megerősítést nyer, például az öröklési jog igazolására, a biológiai anyag gyűjtését az apa oldaláról a nagyszülők végzik. Apasági elemzés elvégezhető a gyermek születése előtt is, magzatvízből vagy korionbolyhokból.

Pater semper incertus est

Az anyával ellentétben az apa mindig bizonytalan. A statisztikák azt mutatják, hogy a férfiak körülbelül négy százaléka nevel egy idegen gyermeket abban a hitben, hogy az saját. Éppen ellenkezőleg, Szlovákiában évente mintegy ötszáz férfi kér apaságot. Az apaság helyes megállapítása megszünteti a szülők közötti kételyeket, és ugyanakkor fontos a kiskorú gyermek jogainak meghatározásában.

Ha bíróság elé kerül az apaság megtagadásának ügye, akkor az igazságügyi genetika területén egy igazságügyi szakértőtől véleményt kell készíteni. Egy ilyen értékelés során hangsúlyt helyeznek többek között a minták pontos azonosítására. A tamponokat vagy a vérmintákat általában igazságügyi szakértő vagy más személy (ápoló) végzi jelenlétében. Ha ez nem lehetséges, akkor a mintákat úgy kell venni, hogy ne vonják kétségbe azok egyértelmű azonosítását. Ha az összegyűjtést orvos végzi, gondoskodnia kell a vett minták pontos azonosításáról. A személyazonosító igazolvány adatai mellett általában ujjlenyomatot is csatolnak a mintához, hogy egyértelműen kimutassák a tesztalany jelenlétét.

Ha egy potenciális apa el akarja kerülni az ilyen eljárást, akkor mintákat vehet magáról és a gyermekről (fiáról) (a lányának DNS-mintát is kell kapnia az anyától), majd közvetlenül kapcsolatba léphet a laboratóriummal.

Bár ezek a tesztek nem állnak ki a bíróságon, információkat nyújthatnak a férfinak arról, hogy van-e értelme bírósághoz fordulnia az apaság megtagadásához (vagy éppen ellenkezőleg: megerősítéséhez). Ha az eredményt egyértelműen kizárja vagy megerősíti az apaság, és az anya nem fogadja el az eredményt, a férfinak bírósághoz kell fordulnia, és újra ki kell töltenie a vizsgálatokat egy igazságügyi szakértővel.

Következtetés

Figyelemre méltó eseményeket észleltünk a DNS-tesztek elvégzése során is. Az orvos az apa egyedi azonosítását kérte. Fokozatosan 6 (szavakkal hat) mintát hozott elemzésre. Nos, nem vitás az ízlés ellen, ahogy apám mondta.

A kíváncsiságok között szerepel minden bizonnyal az anya és a gyermek kapcsolatának megerősítésére irányuló kérés, amelyet az anyasági osztály orvosi személyzete küldött nekünk. Csak azon csodálkozhatunk, miért.

Ebben a tekintetben egy anya kérése, aki megerősítést kért a lányával való kapcsolatáról, nem teljesen értelmetlen, mivel úgy tűnt neki, hogy a gyermek nem hasonlít rá…