inkái

  • elemeket
  • absztrakt
  • Háttér/célok:
  • Tantárgyak/módszerek:
  • az eredmények:
  • következtetés:
  • bevezetés
  • Tantárgyak és módszerek
  • Dizájnt tanulni
  • 1. tanulmány
  • 2. tanulmány
  • Mágneses rezonancia
  • Plazma gyűjtés és CCK teszt
  • Adatok elemzése, statisztikai módszerek és a vizsgálatok erőssége
  • az eredmény
  • 1. tanulmány
  • 2. tanulmány
  • Az éhomi hólyagmennyiség normális tartomány
  • vita
  • További információ
  • PDF fájlok
  • 1. kiegészítő táblázat
  • 2. kiegészítő táblázat

elemeket

absztrakt

Háttér/célok:

Az epehólyag ürítése az etetés hatására döntő fontosságú a zsír emésztése szempontjából, de a különféle élelmiszer-adalékanyagok szerepe az epehólyag későbbi összehúzódásában nem tisztázott. Feltételeztük, hogy a különféle élelmiszer-adalékanyagok eltérő hatással lehetnek az epehólyag kiürülésének stimulálására a fogyasztás után. Ennek kivizsgálására két randomizált, vakon végzett, keresztezett vizsgálatot terveztünk egészséges egyéneknél, amelyek mágneses rezonancia képalkotást (MRI) használnak az epehólyag térfogatának sorozatbeli és nem invazív mérésére.

Tantárgyak/módszerek:

1. vizsgálat: feltáró tanulmány, amely tíz különböző élelmiszer-összetevő hatását értékeli nyolc egészséges egyén epehólyag-ürítésére. Az összetevők megválasztása a szokásos tételektől, például kávé, tea és tej, az aktív összetevőkig, például a kurkuminig és a burgonya proteáz inhibitorig terjedt. 2. vizsgálat: Mechanikus vizsgálat, amely 21 egészséges alanynál négy módon vizsgálta a kolecisztokinin (CCK) dózis-válaszát az 1. vizsgálat leghatékonyabb összetevőjére.

az eredmények:

Az 1. vizsgálatban az epehólyag térfogatában bekövetkezett legnagyobb változást a zsír esetében figyelték meg, amely ezért a 2. vizsgálat dózis-válaszának része lett, ahol az epehólyag térfogatának maximális% -os változása jól korrelált a CCK-val.

következtetés:

Ezek a soros és ismételt teszt vizsgálatok azt mutatták, hogy az éhgyomri hólyag térfogata jelentősen változott az egyének között, és hogy az egyéni napi változékonyság széles variációs együtthatóval rendelkezett. Az epe felszabadulásának élelmiszer-adalékanyagokkal történő stimulálásával kapcsolatos jobb ismeretek hasznosak lehetnek a hidrofób gyógyszerek in vitro biohasznosulási tesztjeinek korrelációjának javításához. Ez javíthatja a koleszterinszint-csökkentő növényi sztanol- és szteroltermékek teljesítményét, és esetleg hozzájárulhat néhány epekő betegség megértéséhez.

A fő hipotézis az volt, hogy a különböző élelmiszer-összetevők, ha elfogyasztják őket, eltérő hatással lesznek az epehólyag ürítésének serkentésére. Ennek megvizsgálására két randomizált, elvakult, crossover vizsgálatot terveztünk egészséges egyéneknél, amelyek mágneses rezonancia képalkotást (MRI) használnak az epehólyag térfogatának sorozatbeli és nem invazív mérésére. Az 1. vizsgálat egy feltáró vizsgálat volt, amely tíz egészséges élelmiszer-adalékanyag hatását értékelte az epehólyag ürítésére nyolc egészséges egyénnél. Valamennyi kiválasztott összetevőt engedélyezték az EU-ban történő felhasználásra, a technológia és az alkalmanként ellenőrzött élelmiszer-adalékanyagok keverékével, és az epehólyag ürítésének serkentő képessége alapján választották ki őket. A 2. vizsgálat egy mechanikai vizsgálat volt, amely megvizsgálta az 1. vizsgálat leghatékonyabb komponensére adott CCK-dózisra adott választ. Ezek a tanulmányok információt szolgáltatnának az éhomi epehólyag mennyiségének normális tartományáról és azok variációs együtthatóiról is.

Tantárgyak és módszerek

Dizájnt tanulni

Mindkét tanulmányt az Egyetemi Orvostudományi Kar helyi kutatási etikai bizottsága jóváhagyta, és minden alany megalapozott írásbeli beleegyezést adott. A vizsgálatot a helyes klinikai gyakorlat elveinek megfelelően végezték el. Az összes tesztelt terméket, az esetjelentési űrlapokat és a tanulmányok ellenőrzését a szponzor biztosította.

A felvételi kritériumok 18-45 éves, egészséges vagy egészséges férfiak voltak, testtömeg-indexük (BMI) 20-30 kg/m 2 volt. A kizárási kritériumok között szerepelt a terhesség, a súlyos és krónikus betegség története, az alkohol és/vagy szerekkel való visszaélés, az MRI ellenjavallt implantátum vagy eszköz jelenléte a testben (pl. Tempókészítők, fémimplantátumok), olyan gyógyszerek használata, amelyek zavarhatják emésztőrendszeri fiziológiával és szterin/sztanol margarin és/vagy rost-kiegészítők alkalmazásával a vizsgálat előtt és/vagy alatt 30 nappal. Az alanyokat arra utasították, hogy a vizsgálati periódus előtt legalább 8 órán át egy éjszakán át böjtöljenek. Minden tanulmányi napon kitöltöttek egy kérdőívet, amely megerősítette, hogy betartották a tanulmányi korlátozásokat és alkalmasságot.

Az adatokat feldolgozó operátort a vizsgáló elvakította egy randomizációs kód előtt, amely kiadta a tesztétkezéseket, és vakon mentette a képfájlokat az MRI szkennerből. A kód csak az adatok feldolgozása és a vak adatok ellenőrzése után tört meg.

MRI képeket használtunk az epehólyag térfogatának kiszámításához minden egyes meghatározott időintervallumban az alábbiakban leírtak szerint, és az epehólyag térfogatának százaléka (%) megváltozott az alapvonaltól és a görbe alatti területtől (AUC) t = −5 és t = 65 perc között.

Az elsődleges végpont az epehólyag térfogatának maximális változása volt% -ban t = -5 és t = 65 perc között. Tesztelt termék. Ezt választották elsődleges végpontnak, mert figyelembe veszi az epehólyag térfogatának maximális változását, amely a vizsgált étkezés utáni időszakban bekövetkezik, és az egyes alanyok epehólyagját a vizsgálat minden napján egy kezdeti koplalási időre normalizálja, ami megkönnyíti a kivitelezést. összehasonlítások e több módszer tanulmányozásában.

Másodlagos végpontok voltak az epehólyag térfogata minden egyes időpontban, a vizsgálati termék szerint,% epehólyag térfogatváltozással t = 45 perc időpontban, AUC az epehólyag térfogatára és az epehólyag térfogatának maximális változásáig eltelt idő.

1. tanulmány

Nyolc tantárgyat vettek fel, és mindegyikük tízirányú tanulmányt végzett. Öt férfi és három nő volt 26,5 ± 8 éves, a BMI 22,5 ± 0,6 kg/m2 volt.

Az alanyok a 10 vizsgálati termék egyikét fogyasztották a 10 tesztlátogatás mindegyikénél (egy hét különbséggel), számítógéppel generált randomizációs ütemezés alapján. A termékek emulziókból, joghurtból, kávéból, teából és félig fölözött tejből álltak, az 1. kiegészítő táblázatban meghatározottak szerint. Minden tesztlátogatás alkalmával az élelmiszer fogyasztása előtt a hasi magasság MRI-jét kaptuk, beleértve az epehólyagot is. = -5 perc), majd t = 5, 15, 25, 35, 45, 55 és 65 perc múlva a vizsgálati termék lenyelése után, minden látogatáskor összesen nyolc vizsgálat. További elemzéssel megvizsgálták az epehólyag térfogatának t = −5 és t = 65 perc közötti maximális% -os változásának összefüggését a tesztelt termékek zsír-, fehérje- és térfogatjellemzőivel.

2. tanulmány

Huszonkét entitást fogadtak el. Egy alany két alkalommal visszalépett, ezért 21 alany fejezte be a négyutas vizsgálatot. 11 férfi és 10 nő volt 27 ± 8 éves, testtömeg-indexük (BMI) 22,5 ± 0,6 kg/m2. A 21 alany közül négy nem adott legalább egy vérmintát (például egy elzáródott kanül miatt), így n = 17 teljes alany állt rendelkezésre a plazma CCK-analízishez.

Az alanyok a négy vizsgálati termék egyikét fogyasztották mind a négy tesztlátogatás alkalmával (1 hét különbséggel), számítógép által generált véletlenszerűsítési ütemterv alapján. A termékek tej alapú italokat tartalmaztak az 1. vizsgálat eredményei alapján. Ezek 150 ml tej alapú italok voltak, amelyek ugyanannyi fehérjét (9 g) és ugyanolyan mennyiségű növényi sztanol-észtert (2, 23) g tartalmaztak, de növekvő mennyiségben zsírmennyiség (1,5 g, 3,5 g, 6,5 g, 10 g zsír).

Minden tesztlátogatás alkalmával egy tapasztalt kutatónővér intravénás kanült helyezett az alkar vénájába. Az epehólyagot érintő hasi MR-felvételt az alapértéknél az élelmiszer fogyasztása előtt (t = -5 perc), majd a beadás után t = 5, 15, 25, 35, 45, 55 és 65 perccel készítettük - a tesztterméket, összesen nyolc beolvasás alkalmával, minden látogatás alkalmával. Minden MRI vizsgálat után vérmintát vettünk egy intravénás kanülből CCK elemzés céljából.

A vizsgálat további másodlagos végpontjai a maximális plazma CCK voltak t = 5 perc és t = 65 perc között, a plazma CCK t = 45 perc alatt, valamint a maximális CCK szintek és az epehólyag térfogatának legnagyobb% -os változása közötti összefüggés t = 5 perc és t = 65 között min.

Mágneses rezonancia

Az MRI-t 1,5 Ach teljes test szkenneren (Philips Healthcare, Eindhoven, Hollandia) 1,5 T teljes test adó-vevővel végeztük. Mindegyik alany a hátára került a szkennerben. Körülbelül felmérést végeztek az epehólyag helyzetének megkeresésére és a képsíkok helyzetének megtervezésére a következő adatgyűjtési vizsgálat céljából. Ezután inverz regenerációval zsírszuppresszált spektrális előtelítettségeket kaptunk, és turbó spin-echo MRI-vel ellátott koronális egyképeket kaptunk. Ezt a képsorozatot a T2 súlyosan súlyozta, így a folyadék nagyon világosnak tűnik, a többi környező szerv pedig elég sötét. 30 szomszédos szakaszt tartalmaznak rés nélkül, a visszhang idő TE = 4,4 ms, visszhang távolsággal 4,4 ms, a befogadó mátrix 268 × 198 és a dőlésszög 90 °, a kapott felbontás 1,5 × 1,5 mm 2 síkban és a 6 szakasz vastagsága mm (rekonstruálva 0,78 x 0,78 x 6 mm 3). Egyetlen 26 másodperces lélegzetvisszafogással kaptuk őket. Az MRI vizsgálat ütemezése lehetővé tette két alany behelyezését reggel, növelve az áteresztőképességet és csökkentve a költségeket.

Plazma gyűjtés és CCK teszt

Érkezéskor egy intravénás kanült BD Venflon Pro 18-al (Becton Dickinson Infúziós Terápia, Helsingborg, Svédország) helyeztek a betegek alkarjába. 6,5 ml-es vérmintákat vettünk éhgyomorra és az étkezés utáni vizsgálat minden egyes időpontjában. A vért azonnal hűtött vérgyűjtő csövekbe helyeztük, amelyek 0,3 ml etilén-diamin-tetraecetsavat és 5000 KIU aprotinint tartalmaztak. A mintákat jeges fürdőben azonnal lehűtjük. A plazmát ezután 10 percen át, centrifugálással, 10 percig, 3000 g-nál, 4 ° C-on könnyen elválasztották. Az elválasztott plazmát műanyag pasztával összegyűjtötték, és tiszta csövekbe helyezték -80 ° C-on történő azonnali tárolás céljából, amíg radioaktív vizsgálattal megvizsgálták a kereskedelemben kapható készletekkel gyártó (EURIA-CCK, Euro-Diagnostica, az Immunodiagnostic Systems, Ids Ltd., Tyne and Wear, Egyesült Királyság), a fent leírtak szerint. 8.

Adatok elemzése, statisztikai módszerek és a vizsgálatok erőssége

Az egyes alanyok és az egyes időpontok képadatait egy munkaállomáson és kereskedelmi szoftveren (Analysis 6, Biomedical Imaging Resources, Mayo Clinic, Rochester, MN, USA) dolgozták ki az epehólyag körüli monitorozáshoz. érdeklődés mindegyik iránt. a "Smart Edge" funkció használatával. Ezt a funkciót általában akkor használják, amikor nagy lejtésű területeket keresnek az érdeklődési terület útvonalának beállításához, segítve az üzemeltetőt annak részleges automatizálásában. Ezután az epehólyag térfogatát úgy számoltuk ki, hogy összesítettük az alany és az idõpont összes érdekeltségi területét. Ezeket táblázatba rögzítettük, és a Microsoft Excel programban ábrázoltuk az időbeli lefutás meghatározása és az AUC kiszámítása érdekében trapéz alakú módszerrel. A húgyhólyag térfogatának% -os változását a következőképpen számítottuk (1 epehólyag térfogata t/epehólyag térfogata a kiindulási értéknél) × 100% -ban kifejezve és t idővel étkezés utáni képalkotási időként definiálva (azaz 5 és 65 perc között).

Amint azt a Shapiro Wilk teszt mutatja, az adatok túlnyomó többsége normálisan eloszlott és átlag ± sem-ként volt kifejezve. Parametrikus statisztikai teszteket használtunk a vizsgálati termékek hatásának és a végpont mérésekig eltelt idő szignifikanciájának értékelésére, majd egy post-hoc Dunnett-tesztet korrigáltunk több összehasonlításra, összehasonlítva az összes vizsgálati terméket 4 ml magas zsírtartalmú emulzióval az 1. vizsgálatban és a legkisebbekkel szemben. zsírminta a 2. vizsgálatban. Mivel keresztvizsgálat volt, mindegyik alany a saját kontrolljaként működött. A plazma CCK-értékek a logaritmikus transzformáció után sem oszlottak el normálisan, ezért nem hajtottak végre kétirányú ANOVA-t. A különbségek P szempontjából szignifikánsak voltak

Reprezentatív példa egy egészséges önkéntes éhomi hólyagján keresztül érzékelt koronális, egyetlen, turbó spin-visszhang mágneses rezonancia képalkotásra (zárt nyilakkal jelölve). Ebben az erősen T2-súlyozott képalkotó szekvenciában az epehólyag folyamata nagyon világosnak tűnik, a többi környező szerv pedig elég sötétnek tűnik, ami elősegíti az adatfeldolgozást.

Teljes méretű kép

1. tanulmány

Az elsődleges végpont az epehólyag térfogatának maximális változása volt% -ban t = -5 és t = 65 perc között. Ez szignifikánsan különbözött a tesztelt termékek között, amint az a 2. ábrán látható (P 0,05) és 4 ml magas zsírtartalmú emulzió (térfogatváltozás 27%, P> 0,05). Az azonos térfogatú italok összehasonlítása azt mutatta, hogy a félig fölözött sovány tej lényegesen nagyobb maximális változást ért el az epehólyag térfogat% -ában, mint a kávé (22%) és a tea (18%) (P

Az epehólyag térfogatának legnagyobb változása% -ban t = -5 és t = 65 perc között egészséges önkéntesek számára, az 1. vizsgálat 10 vizsgálati összetevőjének elfogyasztása után. Az értékek átlag ± fél, n = 8. A = 25 ml tej emulzió; B = 25 ml tejemulzió + 300 mg burgonya proteáz inhibitor; C = 67,5 g joghurtital; D = 67,5 g joghurtital + 3 g fehérje; E = 67,5 g joghurtital + 80 mg kurkumin; F = 250 ml kávé; G = 250 ml tea; H = 250 ml félzsíros fölözött tej; I = 20 ml magas zsírtartalmú emulzió; és J = 4 ml magas zsírtartalmú emulzió. szignifikáns különbség a J komponenshez képest, 4 ml magas zsírtartalmú emulzió (P b Jelentős különbség a J komponenshez képest, 4 ml magas zsírtartalmú emulzió (Pb

A húgyhólyag térfogatának dózisa az idő% -ában egészséges önkéntesek után, a 2. vizsgálatban megnövekedett zsírtartalmú négy tej alapú ital elfogyasztása után. Az értékek átlag ± fél, n = 21.

Teljes méretű kép

A többi eredményt tekintve a zsírtartalom jelentős hatása az epehólyag térfogatára (P

A plazma kolecisztokinin (CCK) görbe alatti területe (CCK) egészséges önkéntesek számára, miután a 2. vizsgálatban mind a négy tejalapú, növekvő zsírtartalmú italt elfogyasztotta. Az értékek átlag ± sem, n = 17. szignifikáns különbség g zsír (P b) Jelentős különbség 1,5 g zsírhoz képest (P b

Az éhomi epehólyag térfogatának dobozos és bajuszos mintázata nyolc egészséges önkéntesnek az 1. vizsgálatban és 21 önkéntesnek a 2. vizsgálatban. A doboz 25 százalékot és 75 százalékot jelent, a dobozban lévő vízszintes vonal az átlagot, a bajusz pedig az epehólyag minimumát és maximumát jelenti. hangerő.

Teljes méretű kép

vita

Az epehólyag ürítését gamma szcintigráfiával vagy ultrahang technikával vizsgálták. 3, 4, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 Az elmúlt években kimutatták, hogy az MRI sorozatban pontosan, nem invazívan és nagy térbeli felbontással méri az epehólyag ürítését. 30, 31, 32, 33, 34 Ezekben a vizsgálatokban a szérum MRI jól teljesített, és hatékony, nem invazív és pontos módszer volt a különféle élelmiszeripari termékek epehólyag-ürítésre gyakorolt ​​hatásának nyomon követésére.

Az 1. vizsgálat fő hipotézise, ​​miszerint a különböző élelmiszer-összetevők eltérő hatást gyakorolnak az epehólyag ürítésének stimulálására, helyesnek bizonyult. Az összetevők megválasztása a szokásos (alkalmanként ellenőrzött) tételek, mint például a kávé, tea és tej, és az aktív összetevők, például a kurkumin és a burgonya proteáz inhibitor (az élelmiszer-előállítás által szabályozott) között változott.

A félzsíros tej jól működött, de ebben a szakaszban nehéz megkülönböztetni, hogy zsír- és fehérjeösszetétele additívan hat-e az epehólyag összehúzódására. A fehérje hozzájárulását a jövőbeni tanulmányok tárgyának kellene tekinteni.

A 2. vizsgálat fő hipotézise, ​​miszerint az 1. vizsgálat legjobb eredményeinek (ebben az esetben az emulgeált zsírnak) dózis-válasz hatása lesz az epehólyag térfogatának maximális% -os változásánál, helyes volt. Ez jól korrelált az emelkedett plazma CCK-szinttel, összhangban a zsírnak a CCK felszabadulásában jól bevált szerepével, amely a zsírsavlánc hosszától (38, 39) és az CCK szerepétől függ az epehólyag ürítésének szabályozásában. Érdekes, hogy a legalacsonyabb zsírtartalmú (1,5 g) tejzsír alapú ital a vizsgált időszakban már elérte az epehólyag térfogatának átlagosan átlagosan 33% -os maximális változását. Ételeink mind alacsony kalóriatartalmúak voltak (például 90 kcal egy 20 ml magas zsírtartalmú emulzióhoz). Sokkal nagyobb mennyiségi változásokat figyeltek meg a magasabb kalóriatartalmú étkezéseknél. A húgyhólyag térfogatának 70% -os változásáról 45 perccel számoltak be, miután 465 kcal szilárd anyag és folyadék 41 keveréke volt, és 70% -kal változott meg az epehólyag térfogata 70 perccel, 675 kcal zsíremulziós teszt étkezés után egészséges egyéneknél.

A minták eltérő térfogata, íze/aromája, színe és szerkezete miatt nem zárhattuk ki az epehólyag ürítésének esetleges bevitt cefalis komponensének jelenlétét ezekben az adatokban. A jövőbeli vizsgálatok egyik ötlete az lenne, hogy a lehető legnagyobb térfogatban/textúrában/aromában/színben új vizsgálati mintákat állítsanak elő. Az ecsethatások segíthetnek az epehólyag térfogatának maximális változásáig tartó időbeli nagy változékonyság magyarázatában is, amely nemcsak az alanyok között, hanem a vizsgálati napok között is eltérő volt. Meg kell jegyezni, hogy néhány elvégzett kísérletben az epehólyag térfogatának maximális változásáig eltelt idő 65 perc volt, ami arra utal, hogy a térfogat változása későbbi időpontokban nagyobb lehetett, mint a vizsgálati időszak. A vizsgált időtartam korlátozza ezt a vizsgálatot, és a jövőbeni vizsgálatok során kívánatos lenne a monitorozási időablak legalább 120 percre történő kiterjesztése az epehólyag ürítésének teljes lefoglalása érdekében. A CCK 48 intravénás infúziója standardként alkalmazható az epehólyag ürítésében.

Összegzésképpen elmondható, hogy a különböző élelmiszer-adalékanyagok az epehólyag különböző mértékű kiürülését indukálhatják. A különféle vizsgált élelmiszer-összetevők és hatóanyagok közül a zsírok és a félzsíros tej okozta a legnagyobb mennyiségi változást. A zsír mutatta a legerősebb hatást, amely korrelált a plazma CCK szintjével. Az epe felszabadulásának élelmiszer-adalékanyagokkal történő stimulálásával kapcsolatos jobb ismeretek hasznosak lesznek az in vitro/in vivo biológiai hozzáférhetőség biológiai hozzáférhetőségének korrelációjának javításához. Ez javíthatja a koleszterinszint-csökkentő növényi sztanol- és szteroltermékek teljesítményét, és esetleg hozzájárulhat néhány epekő betegség megértéséhez.