absztrakt

A cél: A karotinoidok tartalmának jellemzése a mediterrán étrend kiválasztott összetevőiben, amelyeket a görög migránsok gyakran fogyasztanak Melbourne-be, a népesség azon csoportjába, amely hagyományos étrendet tart és viszonylag magas cirkuláló karotinoid-koncentrációt mutat, és alacsony a szív- és érrendszeri betegségek halálozása.

Terv és minták: Vadon élő (sáska bogáncs, amarant, sonka és pitypang, utakról és kertekből szüretelt) és kereskedelmi forgalomban kapható (cikória, endívia) zöld leveles zöldségek és fügék gyűjteménye szezonban. Az ételeket az alapján választották meg, hogy általában görög migránsok fogyasztják őket, de nem angol-kelta egyének, és korábban karotinoid-tartalmuk szempontjából nem voltak jól jellemezve. Extra szűz, hidegen sajtolt olívaolajat és "extra könnyű" olívaolajat nyertek kereskedelmi forrásokból. A mintákat tetrahidrofuránnal (vagy kloroform: metanol olívaolajhoz) extraháltuk, és a karotinoid tartalmat HPLC-vel UV-detektálással meghatároztuk. Két-hat zöld és füge mintát elemeztek. Az ételbevitelt élelmiszer-gyakorisági kérdőív segítségével értékelték.

Az eredmények: A vad zöld zöldségek nagy koncentrációban tartalmaztak luteint (koca bogáncs> amarant> porturán> pitypang) és β-karotint (disznó bogáncs> amarant> répa = pitypang). A bogáncs bogáncs és az amarant luteint (15 és 13 mg/100 g) és β-karotint (3, 3 és 4,0 mg/100 g) tartalmazott magasabb koncentrációban, mint a kereskedelemben kapható cikória és endívia fajokban. ÁBRA. Tartalmazták az összes fő, a plazmában megjelenő karotinoidot, bár alacsony koncentrációban. A hidegen sajtolt extra szűz olívaolaj jelentős mennyiségű luteint és β-karotint tartalmazott, de a finomabb "extra könnyű" olívaolajat nem.

Következtetések: A hagyományos mediterrán étrend ezen összetevői hozzájárulnak a keringő karotinoidkoncentrációk növekedéséhez a görög migránsokban az angol-kelta ausztrálokhoz képest.

Szponzorálás: Ezt a tanulmányt nagyrészt az ausztráliai Egészségügyi és Orvosi Kutatási Tanács finanszírozza (támogatás száma: 974098). Extra szűz olívaolaj, amelyet a Picuba Foods adományozott, Marrickville, NSW, Ausztrália.

Hét országból végzett tanulmány kimutatta, hogy a mediterrán populációkban, különösen Krétán, volt a legalacsonyabb az ischaemiás szívbetegség (CHD) halálozási arány Európában (Keys és mtsai, 1986). Az 1950-es évek krétai étrendjét (Kromhout et al, 1989) gyakran archetipikus mediterrán étrendnek tekintik. Érdekes módon ez az időszak egybeesik a Görögországból Ausztráliába irányuló nagy vándorlással. A melbourne-i görög migránsok viszonylag alacsony koszorúér-halálozási mortalitással rendelkeznek annak ellenére, hogy magas a kockázati tényezők, például az elhízás, a cukorbetegség, a magas vérnyomás és a dohányzás aránya (Young, 1992; Australian Bureau of Statistics, 1998), és ez a népesség megtartotta a Krétai étrend (Kouris-Blazos et al., 1996). Az étrendi antioxidáns vegyületekről úgy gondolják, hogy legalább egy védelmet nyújtanak a zöldségekben, gyümölcsökben és olívaolajban gazdag étrendhez, például a krétai mediterrán étrendhez (Simopoulos & Sidossis, 2000; Visioli, 2000). Egyes epidemiológiai vizsgálatok fordított összefüggést állapítottak meg a gyümölcsök és zöldségek táplálékfelvétele vagy plazma karotinoidkoncentrációi és a CHD előfordulása között (Gey és mtsai., 1993; Kohlmeier és mtsai., 1997).

A múltban néhány karotinoid és néhány azonosítatlan vegyület magasabb koncentrációját azonosítottuk a görög migránsok körében, mint az ausztrálok, a melbourne-i kollaboratív kohortvizsgálatban (MCCS; Su et al., 1998). Lehetséges, hogy ezeknek a karotinoidoknak a görög migránsok körében magasabb koncentrációját a mediterrán étrend bizonyos összetevőinek, például a vad sötétzöld zöldségek, füge, olajbogyó, szőlőlevél és más, nem normális zöld leveles zöldség nagyobb mennyiségű bevitele okozta. . az angol-kelta származású ausztrálok fogyasztják. Ezeket az ételeket karotinoid tartalmuk miatt nem jellemezték jól. E tanulmány célja a vadon élő zöldségfélék, a füge és az olívaolaj karotinoidjainak elkülönítése és mennyiségi meghatározása volt, amelyek a hagyományos görög étrend részét képezik, és amelyek hozzájárulhatnak a keringő karotinoidok magas szintjéhez a görög migránsokban.

mód

Táplálékbevitel

Az élő és kereskedelmi forgalomban kapható zöld leveles zöldségek, füge és olívaolaj bevitelét az étrendben egy élelmiszer-gyakorisági kérdőív (Írország és mtsai, 1994) alapján határozták meg a görög migránsok és az ausztráliai születésű (főleg angol-kelta) emberek körében. MCCS-től (Giles)., 1990). Az MCCS egy közösségi alapú prospektív tanulmány, amely a táplálkozás krónikus betegségekben betöltött szerepét vizsgálja, és amely nagyszámú dél-európai migránst tartalmaz. Az adatokat fejenként és hétenként (vagy olívaolaj esetén hetente ml-ben) fejezzük ki. A zöldségek "pincérnője": "fél csésze főtt zöldség vagy egy csésze saláta zöldség". A füge adagja 140 g volt.

Reagensek és anyagok

Magnézium-karbonátot, vízmentes nátrium-szulfátot, butilezett hidroxi-toluolt (BHT) és az összes transz-béta-karotin, all-transz-a-karotin és transz-glikol referencia mintáit a Sigma-Aldrich Pty Ltd-től (Castle Hill) vásároltuk. Ausztrália). A lutein, a zeaxanthin és a p-cryptoxanthin Hoffmann-LaRoche (Basel, Svájc) adományai voltak. Belső standardként Β-Apo-8-karotenalt (transz) (Fluka Chemical Corp.) használtunk. A HPLC oldószereket és egyéb reagenseket helyi forgalmazóktól szereztük be (Mallinkrodt, Selby-Biolab; Melbourne, Ausztrália).

Nyers zöldségek és gyümölcsök, valamint olívaolaj

Vad sötétzöld zöldségeket (bogánskoca, pitypang, amarant, portulán) február (nyár) folyamán szüreteltek Melbourne útjairól és kertjeiről. A források azok voltak, amelyek a növények fogyasztásra való betakarításához általában rendelkezésre állnak. A kereskedelmi leveles zöldségeket (cikória, endívia) az Oakleigh Market-től (Victoria, Ausztrália) szerezték be. Friss, friss fügét szüreteltek a helyi kertben áprilisban. Az összes mintát műanyag zacskókban tároltuk, és sötét hűtőszekrényben, 4 ° C-on tároltuk az elemzésig (24 órán belül). A mintákat a szokásos módon fogyasztottuk, és a teljes mintát elemeztük. Vad zöld gyümölcs esetén az ehető rész csak leveleket tartalmaz. Az extra szűz olívaolajat (természetesen hidegen sajtolva) a Picuba Foods, Marrickville, NSW (a Minosz Extra szűz olívaolaj, Görögországból importálta) szállította. Az "extra könnyű" olívaolajat egy helyi szupermarketből szerezték be (Bertolli "Extra Light", amelyet a Bertolli Australia Pty Ltd importált Olaszországból).

Élelmiszerminták előkészítése és kivonása

Az olívaolaj elemzéséhez 1 g olívaolajat és 1 ml belső standardot keverünk, majd 0,1 g magnézium-karbonátot és 10 ml kloroform: metanol (2: 1) elegyet keverünk. Az oldatot 30 percig sötétben tartottuk, elválasztótölcsérbe helyeztük és vízzel (2x20 ml) mostuk a vízoldható anyagok eltávolítása céljából. A szerves fázist elválasztjuk, és további vizes fázishoz 10 ml kloroform: metanol (2: 1) elegyet adunk. A szerves rétegeket egyesítettük, szárítottuk és helyreállítottuk a fent leírtak szerint.

Standard görbe és kromatográfia

UV-látható spektrofotométert (Hewlett-Packard) használtunk a standard oldatok koncentrációjának meghatározására. Belső standard β-apo-8-karotenalt (transz) készítettünk 0,01% butilezett hidroxi-toluolt (BHT) tartalmazó hexánnal barna palackban. A β- és α-karotin törzsoldatához transzglikoén, lutein, zeaxantin és β-kriptoxantin oldószerként n-hexánt (0,01% BHT) használtunk. A transz-glikopént 1 ml diklór-metánban oldjuk, majd 0,01% BHT-t tartalmazó n-hexánnal hígítjuk. Az a- és y-tokoferolt etanolban oldjuk. Az analitok standard görbéit a belső standard és a koncentráció/csúcs terület aránya alapján állítottuk elő. Az azonosítatlan vegyületkoncentrációk kiszámítását lutein/zeaxantin standard görbe alkalmazásával végeztük.

Az alkalmazott kromatográfiai rendszer tartalmazott egy Alliance 2690 elválasztó modult, egy 996-os fotodióda-detektort és egy Millennium Chromatography PDA szoftverkezelő menedzsert (Waters Australia, Melbourne, Ausztrália); Spherisorb ODS-2 oszlop (250 x 4,6 mm; Goldpak, Egyesült Királyság), HP BIO patrontartó és biokompatibilis védőpatron (10 × 4,3 mm C18; Activon, Melbourne, Ausztrália). Acetonitril: metanol: kloroform (45:45:10) mozgófázist használtunk, amely 0,05% ammónium-acetátot tartalmaz metanolban és 0,1% trietil-amint acetonitrilben, 1,0 ml/perc áramlási sebességgel. A futási idő 24 perc volt. Az egyes karotinoidokat (luteint, zeaxantint, β-kriptoxantint, likopint, β- és α-karotint) 450 nm-en figyeltük. A variációs együttható a nap folyamán 8, 7, 7, 8, 10, 3, 8, 4 és 6,9% volt a lutein, a kriptoxantin, a likopin, az α-karotin és a β-karotin esetében. A kimutatási határ, amelyet az átlagos háttérzajnál háromszor nagyobb csúcsmagasságként definiáltak (Shah és mtsai., 1991), kevesebb mint 1 ng volt (kb. 0,4 ug/100 g élelmiszerkoncentrációnak felel meg).

az eredmény

Táplálékbevitel

Az 1. táblázat mutatja a zöld leveles zöldségek, a füge és az olívaolaj bevitelét az MCCS-től vett görög és ausztrál családok ételeiben. A zöld leveles zöldségeket (ideértve az itt elemzett vad és kereskedelmi forgalomban kapható fajokat is) a görög születések körében körülbelül kétszer olyan gyakran fogyasztják, mint az ausztrál születéseket. A megkérdezett ausztrál emberek egyike sem számolt be füge evésről. Az olívaolaj-fogyasztás több mint háromszor nagyobb volt, mint az Ausztráliában született embereké.

Asztal teljes méretben

Karotinoidok és tokoferolok kimutatása és mennyiségi meghatározása zöldségfélékben, füge és olívaolajban

Az 1. ábra a vad zöld zöldségek (tövis bogáncs, amarant, portúr és pitypang) kromatográfiás profilját mutatja. A lutein és a β-karotin volt a fő csúcs. A kereskedelemben kapható fajok (cikória és endívia) kromatogramjai minőségileg hasonlóak (nem látható). A vad sötétzöld zöldségekben magas a lutein és a β-karotin koncentrációja (2. táblázat). A bogáncs bogáncs és amarant luteinszintje magasabb volt, mint a cikória és az endívia mintáké. A porcsin és a pitypang szintén jelentős mennyiségű luteint tartalmazott. A fügeiben jelen lévő karotinoidok közé tartozik a lutein, a kriptoxantin, a likopin, a β-karotin és az a-karotin. A leggyakoribb karotinoid a likopin volt (2. táblázat), amelyet a lutein és a β-karotin követett. Az extra szűz olívaolaj luteint és β-karotint tartalmazott. Más karotinoidok nem voltak kimutathatók. Az extra könnyű olívaolaj nem tartalmazott kimutatható mennyiségű karotinoidot, de magasabb volt az α-tokoferol tartalma, mint az extra szűz olívaolajé.

mediterrán

Vad zöld zöldségek kromatográfiai profiljai. egy belső standard; U1 - U9, azonosítatlan vegyületek 1–9.

Teljes méretű kép

Asztal teljes méretben

Azonosítatlan vegyületek jellemzése és mennyiségi meghatározása

A zöld leveles zöldségekben számos azonosítatlan vegyület volt jelen. Az összes vizsgált zöld leveles zöldség esetében a fő csúcsok 4, 3, 4, 8 és 11 percnél eluálódnak, a negyedik pedig 15 percnél következik be minden faj esetében (beleértve a cikóriát és az endíviát is), kivéve a purslant (1. ábra). A porcsin 18 percnél nagyobb csúcsot mutatott, amely más fajokban nem jelent meg (1. ábra). A 2. ábra a fő, azonosítatlan csúcsok acetonitril: metanol: kloroform (45:45:10) UV-látható spektrumát mutatja. Ezeket a vegyületeket nem figyeltük meg plazmamintákban, beleértve a több mint 200 görögországi görög emberét (Su és mtsai, nem publikált adatok). A 3. táblázat az azonosítatlan vegyületek abszorpciós maximumait és koncentrációit mutatja a vad és zöld leveles zöldségekben. Az U5 vegyület jelentős mennyiségben volt jelen minden fajban, de a forsulában. A zöld leveles zöldségekben jelenlévő ismeretlen vegyületek nem voltak kimutatható mennyiségben füge vagy olívaolajban.

A vadon élő zöldségek főbb, azonosítatlan csúcsainak abszorpciós spektrumai.

Teljes méretű kép

Asztal teljes méretben

vita

Találtunk extra szűz olívaolajat (hidegen sajtolt), amely luteint és β-karotint, valamint jelentős mennyiségű α- és γ-tokoferolt tartalmaz. A finomabb "extra könnyű" olívaolaj nem tartalmazott karotinoidokat a módszerünkkel kimutatható mennyiségben. A luteint (0,3 mg/100 ml) és a β-karotint (0,07 mg/100 ml) extra szűz olívaolajban azonosították kolorimetriás módszerrel (Ranalli és mtsai, 1999b). Ezek az eredmények a lutein esetében hasonlóak voltak, de a β-karotin tartalom alacsonyabb volt, mint amit azonosítottunk. Ez lehet valódi különbség az olajbogyó fajtája vagy az évszakos/éghajlati hatások miatt, vagy pedig a módszertani különbségek miatt műtárgy lehet. Más vizsgálatok azonosították az a-tokoferol-tartalom tartományát, amely megegyezik az ebben a vizsgálatban azonosítottal (García és mtsai., 1996; Gutiérrez és mtsai., 1999; Ranalli és mtsai., 1999a).

Ennek a vizsgálatnak a korlátja az elemzett élelmiszerminták kis száma és egy mintavételi idő. Ami a begyűjtés időpontját illeti, ezeket az ételeket általában csak az év bizonyos szakaszaiban fogyasztják, amikor éppen szezonban vannak, különösen az amarant, a sonka és a füge esetében, és az ebben a vizsgálatban használt mintákat abban az időben gyűjtötték. A mért karotinoid-tartalom tehát releváns a normálisan fogyasztottakra nézve. Ezen élelmiszerek karotinoidtartalmának biológiai variabilitásának megfelelő értékeléséhez szisztematikus mintavételi stratégiára van szükség, amely számos földrajzi és (mikro) éghajlati körülményt tartalmaz, de meghaladta a tanulmány kereteit. A zöldségek karotinoidprofilja sokkal összetettebb, mint korábban találtuk, a különböző karotinoidokként előforduló arány és formák jelentősen változnak a növekedés, a tárolás és a feldolgozás körülményeitől függően (Nyambaka & Ryley, 1995). Figyelemre méltó, hogy az ebben a dokumentumban leírt vad zöld zöldségeket általában néhány órán belül betakarítják és elfogyasztják. Ezen szempontok további részletes tanulmányozása indokolt.

Végül magas koncentrációban találtunk luteint és β-karotint a vadon élő zöldségfélékben, amelyeket általában a hagyományos mediterrán étrend részeként fogyasztanak. A figurák és az extra szűz olívaolaj szintén fontos karotinoidforrások egy ilyen étrendben.

köszönöm

Ezt a munkát főként az Ausztrál Egészségügyi és Orvosi Kutatások Nemzeti Testületének támogatásával finanszírozták (No. 974098). A szerzők hálásan értékelik Dr. Rachel Stoney, valamint Mary Kaimakamis és Melissa Cameron által nyújtott segítség.