szindróma

  • absztrakt
  • a cél:
  • tervezés:
  • tantárgyak:
  • méretek:
  • az eredmények:
  • következtetés:
  • bevezetés
  • mód
  • elemeket
  • mérés
  • A trombocita aggregációja a leptintől függ
  • Analitikus megközelítés
  • az eredmény
  • vita

absztrakt

Annak igazolása, hogy a leptinre adott vérlemezke-válasz társul-e a metabolikus szindróma kockázati tényezőivel.

tervezés:

tantárgyak:

169 egymást követő beteget vizsgáltunk, átlagéletkor = 43, 6 ± 9, 9 év, túlsúly (N = 57) vagy elhízás (N = 112).

méretek:

Klaszteranalízist alkalmaztunk három klaszter előállítására, a vérlemezkék érzékenysége alapján a növekvő leptin dózisokra. A háromklaszteres metabolikus szindróma kockázati tényező profilját diszkrimináns elemzéssel hasonlítottuk össze.

az eredmények:

Az 1. klaszterben hiányzott a thrombocyta érzékenysége a leptinre, míg a 3. klaszter volt a legnagyobb válasz a thrombocyta aggregációra a leptin preinkubációja során. A plazma leptin szintje mindkét nemnél szignifikánsan csökkent az 1. és a 3. csoport között. A 2. klaszterben szenvedő betegek mérsékelt leptin érzékenységi profillal rendelkeztek. A legmagasabb testtömeg-index (BMI) értékek gyakoribbak voltak a nem válaszadóknál, míg a magas derékkörfogat, valamint a hipertrigliceridémia és a magas vérnyomás prevalenciája nőtt a leptin válasz növekedésével az 1. csoportból a 3. csoportba. mint csoportspecifikus az 1. klaszter 69,0% -ában, a 2. klaszter 54,9% -ában és a 3. klaszter 55,8% -ában. A keringő leptin, a derék kerülete, a plazma trigliceridjei és a BMI meghatározta a metabolikus szindróma kockázati tényezőinek jellemző mintáit a klaszterekben.

következtetés:

Túlsúlyos és elhízott járóbetegeknél a metabolikus szindróma kockázati tényezői bizonyos mértékben párhuzamosak a leptinre adott trombocita-reakcióval. Ilyen összefüggések lehetnek a plazma leptinszintje, a derékbőség, a plazma trigliceridek és a BMI, és hozzájárulhatnak a túlsúlyos és elhízott betegek kardiovaszkuláris eseményeinek túlzott kockázatához.

Az elhízásról ismert, hogy felgyorsult aterotrombózissal, valamint a kardiovaszkuláris morbiditás és mortalitás fokozott gyakoriságával társul. Számos bizonyíték bizonyítja, hogy a túlsúlyt gyakran kísérő anyagcsere-rendellenességek, például inzulinrezisztencia, magas vérnyomás, hipertrigliceridémia és nagy sűrűségű lipoprotein (HDL) koleszterin elősegítik az ateroszklerózis előrehaladását elhízott betegeknél. 1., 2., 3. A megváltozott hemosztatikus egyensúly szintén hozzájárulhat az akut kardiovaszkuláris események túlzott kockázatához elhízott egyéneknél. 4, 5

A leptin, az ob gén 6 terméke, főként a zsírszövet által kiválasztott fehérje, amely jelzi az energiakészletek nagyságát a központi idegrendszer felé azáltal, hogy modulálja az élelmiszer-bevitel és az energia-egyensúly szabályozásában szerepet játszó hipotalamusz-centrumok aktivitását. 7 Bár úgy tűnik, hogy a leptin fő szerepet játszik a testtömeg és az energia-anyagcsere szabályozásában, egyes bizonyítékok arra utalnak, hogy ez a hormon más patofiziológiai mechanizmusokban is szerepet játszhat, például immunfunkcióban, angiogenezisben, csontképződésben, termékenységben és leptin receptor expresszióban. különböző szövetekben bizonyították. 8, 9, 10, 11, 12, 13

A metabolikus szindróma az egymással összefüggő kockázati tényezők konstellációja, amelyek úgy tűnik, hogy közvetlenül támogatják az érelmeszesedéses szív- és érrendszeri betegségek kialakulását. 22, 23 A metabolikus szindróma hiperkoagulálható állapothoz is társul, amely a koagulációs faktorok (szöveti faktor, VII. Faktor és fibrinogén) fokozott szintjéből, valamint a fibrinolitikus út gátlásából áll (megnövekedett plazminogén aktivátor inhibitor-1 és csökkent szöveti plazminogén aktivátor tevékenység). Ezenkívül a metabolikus szindróma társulása az endotheliális diszfunkcióval és a dyslipidaemiával a thrombocyta aggregációt indukálja, tovább növelve a trombotikus események kockázatát. 24 A leptinre adott vérlemezke-válasz és a metabolikus szindróma kapcsolatának vizsgálata ezért különösen érdekes.

Ebben a tanulmányban azt a hipotézist teszteltük, hogy a trombociták leptin iránti érzékenysége metabolikus szindróma változókkal társul annak igazolására, hogy a válaszadókat tipikus klinikai/metabolikus, magas kockázatú fenotípus jellemzi.

mód

elemeket

Sorozatunk 169, túlsúlyos vagy elhízott tájékozott beleegyezéssel rendelkező betegből állt, akik fokozatosan kerültek be az ambulanciára az elhízás megelőzésére és kezelésére az olaszországi Messinai Egyetemi Kórházban. Azokat az alanyokat, akik antitrombotikus szerekkel (beleértve az aszpirint is), fogamzásgátlóval vagy hormonpótló terápiával kezeltek, kizártuk a vizsgálatból. A metabolikus szindróma diagnosztikai kritériumait az Egyesült Államok Nemzeti Koleszterin Oktatási Programja - Felnőtt Kezelő Panel III (NCEP ATP-III) javasolta: a derék kerülete férfiaknál 102 cm, nőknél 88 cm; plazma trigliceridek -150 mg/dl; HDL-koleszterin 23 A vizsgálati protokollt a helyi etikai bizottság hagyta jóvá.

mérés

A testmagasságot cipő nélkül mértük 0,5 cm pontossággal; a testtömeget ruházat nélkül mértük 0,1 kg pontossággal; a testtömeg-indexet (BMI) súly/magasság (kg/m2) formájában számoltuk. A szalag kerületét a bordák alsó széle és az ágyéki gerinc között félúton mértük. Az artériás vérnyomást Riva-Rocci vérnyomásmérővel (Zenith, Róma, Olaszország) mértük. A nyugalmi állapotban fekvő betegektől a vérnyomásértékeket legalább 5 percig összegyűjtöttük. Az első mérést kizártuk, és a következő három, 3 perces időközönként végzett mérés átlagát vettük figyelembe. Az éhomi plazma glükóz (AutoAnalyzer, Beckman, Milánó, Olaszország), HDL koleszterin, trigliceridek (CHOP-PAP eljárás, Boehringer Biochemia, Milánó, Olaszország) és leptin (Human Leptin RIA készlet, Linco Research Inc., St. Charles, MO, USA )). minden beiratkozott beteg esetében megmértük.

A nők hormonális állapotáról (post-/premenopauzális) is gyűjtöttek információkat. Az elemzés figyelembe vette a dohányzási szokásokat és a vérnyomáscsökkentő, hipoglikémiás és/vagy zsírcsökkentő gyógyszerek alkalmazását a vizsgálatba való felvétel előtti hónapban.

A trombocita aggregációja a leptintől függ

A leptinre adott thrombocyta aggregációs választ a fent leírtak szerint mértük. 19., 20. Röviden, egyéjszakás böjt után vénás vérmintát nyertünk fekvő helyzetben lévő betegektől a váll köbös vénájából a gyűjtés előtt 30 perccel elhelyezett kanül segítségével, az injekciós stressz elkerülése érdekében, és lassú sóoldat infúzióval fenntartva. (0,5 ml/perc). Vérmintákat (25 ml) vettünk egy kúpos polipropilén csőben, amely 3,33 ml/l citromsavat/nátrium-citrátot/szőlőcukrot (ACD) tartalmaz (64 mmol/l citromsavból, 85 mmol/l nátrium-citrátból és 111 mmol/l dextrózból áll). ).

Trombocitákban gazdag plazmát (PRP) kaptunk 800 g-nál 20 percig, 4 ° C-on végzett centrifugálással. A PRP-t 2000 g-vel 4 ° C-on centrifugáltuk, így lágy trombocita-pelleteket kaptunk, amelyek N-2-hidroxi-etil-piperazin-N '-2-ben szuszpendálódtak. -etánszulfonsav és kálium-hidroxid (HEPES) Tyrod puffer (HEPES-pufferolt sóoldat (HBS)). amely 145 mmol/l NaCl-ból, 5 mmol/l KCl-ból, 0,5 mmol/l NaH2P04-ből, 1 mmol/l MgS04-ből, 5,5 mmol/l glükózból, 3,0 mg/l szarvasmarha-szérumalbuminból, 10 mmol/l HEPES-ből áll, pH = 7, 4 és egyszer mossuk. A centrifugálást 4 ° C-on hajtottuk végre, hogy minimalizáljuk a thrombocyta spontán aktiválódását. 25

A lemezeket megszámoltuk (Coulter International Corporation, Miami, FL, USA), és HBS pufferben szuszpendáltuk 0,5-1 x 10 8 lemez/ml koncentrációban. 1 mmol/l CaCl2-t tartalmazó alikvotokat (0,4 ml) adagoltunk aggregométer küvettákba. A HBS aliquot részét használtuk referenciaként, hogy az optikai aggregációs kísérletek 100% -át jelezzük. Az agonistára adott aggregációs reakciót optikailag monitoroztuk (PACKS4, Helena Laboratories, Beaumont, TE, USA). A fényáteresztést folyamatosan összehasonlítottuk a HBS fényáteresztő képességével. A thrombocyta aggregációt a maximális aggregáció% -ában fejeztük ki.

A leptin agonista által kiváltott aggregációra gyakorolt ​​hatásainak tanulmányozásához 0,4 ml trombocita szuszpenziót 5, 10, 25, 50 vagy 100 ng/ml leptinnel (Linco Research Inc., St. Charles, MO, USA) inkubáltunk 5 percig, majd stimulált adenozin-difoszfátot (ADP) (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) 2 μmol/l (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA).

Analitikus megközelítés

A pácienseket K-analitikai klaszteranalízissel három csoportba csoportosítottuk, az ADP-re adott 2 μmol/l maximális aggregációs válasz% -uk alapján, a pre-inkubálás után, növekvő dózisú leptinnel. A% -os összesítés torz eloszlása ​​miatt az adatokat logóval transzformálták. A klaszteranalízis lehetővé teszi a betegek csoportosítását olyan csoportokba, amelyek markáns vérlemezke-aggregációs profillal rendelkeznek a leptin növekvő dózisainak hatására. A négyzet alakú euklideszi távolságokat kiszámítottuk, hogy értékeljük a betegek közötti különbséget vagy távolságot a többdimenziós térben, a maximális aggregáció% -ával meghatározva. Minél kisebb a távolság, annál nagyobb az affinitás a betegek között, vagyis a thrombocyta aggregációs profiljuk között.

A modellt három klaszter létrehozására kényszerítették, mert az egyetlen vizsgálatot a válaszadókat és a nem reagáló betegeket összehasonlítva szegény donorok lemezeivel végezték. Az elhízott donoroktól származó, a vérlemezkékre adott válaszreakciók modelljének a priori meghatározása a rendelkezésre álló ismeretek alapján korlátozhatja a leptinre adott vérlemezke-válasz és a metabolikus szindróma kockázati tényezői közötti kapcsolat megértését. Korábban beszámoltunk arról, hogy a túlsúly és az elhízás a leptin iránti vérlemezke-érzékenység fokozatos progresszív csökkenésével jár. Ezért arra a következtetésre jutottunk, hogy a modell három klaszter létrehozására való kényszerítése jó stratégia lehet a hipotézis szerint, hogy a nem reagálók és a válaszadók között közepes szintű lesz a thrombocyta érzékenység.

az eredmény

A vizsgálatba bevont betegek átlagos életkora 43,6 ± 9,9 év volt. A betegek többsége nő volt (66,9%), és 169 betegből 112-nek a BMI-je legalább 30 kg/m2 volt. A metabolikus szindróma leggyakrabban megfigyelt kockázati tényezői az alacsony HDL-koleszterin (47,9%) és a magas derékkörfogat (46,7%) voltak, amelyet a magas vérnyomás (38,5%), a hipertrigliceridémia (35,5%) és a hiperglikémia (33, 5%) követett. 7%). A posztmenopauzás státusz a beiratkozott nők 37,2% -ában volt jelen.

A három azonosított klaszterben a növekvő leptin-dózisokkal végzett preinkubációra adott maximális aggregációs válasz% -a az 1. táblázatban látható. Az 1. klaszterben lévő (nem reagáló) betegek lemezei nem reagáltak a leptin preinkubációjára, és a maximális aggregáció% -a hasonló volt az egyedüli ADP 2 μmol/l-hez (a maximális aggregáció log-transzformált% -a = 0,4 ± 0,3). Ezzel szemben a 3. klaszterben lévő betegek (nagyon reagálók) lemezei nagyon magas érzékenységet mutattak a leptinre, amely 10 ng/ml koncentrációnál kezdődött, egyértelmű dózis-válasz összefüggéssel. A 2. klaszter (közepesen reagáló) profilja a leptin-függő vérlemezke-aggregációról szólt az 1. és a 3. csoport csoportjai között. A nem reagáló betegeknél a plazma leptin-koncentrációja magasabb volt, mint a mérsékelten és erősen reagáltak, és a nem nem befolyásolta ezeket az eredményeket. (1. sor).

Asztal teljes méretben

A plazma leptinszintje három csoportban.

Teljes méretű kép

Az életkor, a nem, a dohányzási szokások és a menopauza utáni állapot nem tett különbséget a három klaszter között. A túlsúlyos betegek (BMI = 25–29,9 kg/m 2) gyakoribbak voltak a magas válaszaránnyal rendelkező betegeknél, míg a nagyon elhízott (BMI = 35 kg/m 2 vagy annál nagyobb) betegeknél a válasz nélkül. Ezzel szemben a nagy sávszélesség prevalenciája nőtt a leptinre adott válasz fokozódásával az 1. klaszterből a 3. klaszterbe. A magas plazma tripgliceridek, a HDL-koleszterin és a vérnyomás gyakoribb volt azoknál a betegeknél, akiknél közepes vagy magas válaszreakció volt, a nem reagálókhoz képest. A plazma glükóz nem volt szignifikánsan összefüggésben a trombociták leptin iránti érzékenységével, valamint a vérnyomáscsökkentő, hipoglikémiás és lipidcsökkentő gyógyszerek alkalmazásával (2. táblázat).

Asztal teljes méretben

A diszkrimináns elemzés két megkülönböztető funkciót azonosított, amelyek közül az első nagyon szignifikáns volt (3. táblázat). Az 1. csoportban magas volt az egyetértés a tényleges és feltételezett klasztertagság között (nem reagál). A megállapodás tisztességes volt a 2. és 3. klaszter esetében (közepes és erősen reagál): a 2. és 21. klaszterben lévő betegek 10,9% -át, a 3. klaszterben lévő betegek 5% -át funkcionálisan az 1. klaszterhez sorolták (4. táblázat). A csoportokon belüli közös korrelációs mátrix azt mutatta, hogy a BMI és a derék kerülete közötti kapcsolat együtthatója 0,20, a Kappa együttható 0,41, ami megfelel a valós és feltételezett klasztertagság közötti tisztességes vagy mérsékelt általános megegyezésnek. Amikor kizártuk a BMI-t és a derékbőséget a diszkrimináns modellből, az esetek csupán 44,4% -át soroltuk be helyesen. A megfelelő értékek önmagában a BMI, a derék kerülete vagy mindkét változó bevonásával 52, 6, 53, 8 és 60,0% voltak.

Asztal teljes méretben

Asztal teljes méretben

A rendkívül szignifikáns Box M együttható azt mutatta, hogy a diszkrimináns funkció alapján történő téves osztályozás kockázata nagyon alacsony volt, vagyis az egyes leptinre adott trombocita válaszprofilok meghatározása nagyon megbízható volt. Az elemzés során figyelembe vett változók közül a plazma leptin koncentrációja, a sáv kerülete, a plazma trigliceridek és a BMI jelentősen hozzájárult a diszkrimináns funkcióhoz (5. táblázat). Amikor a BMI-t kizárták az elemzésből, a sávkerület-együttható kissé megnőtt, 0,427-ről 0,499-re. Kor, nem, dohányzási szokások, posztmenopauzális állapot, éhomi plazma glükóz, valamint vérnyomáscsökkentő, hipoglikémiás vagy lipidcsökkentő szerek alkalmazása nem járult hozzá 1 vagy 2.

Asztal teljes méretben

vita

A tanulmány új megállapítása bizonyíték arra, hogy a túlsúlyos vagy elhízott betegek csoportosíthatók a leptinre adott vérlemezkékre adott válaszképességük mértéke alapján, és hogy a metabolikus szindróma kockázati tényezői hozzájárulhatnak a válaszadók klinikai profiljának meghatározásához.

Az egészséges donorokból származó érzékeny és nem reagáló vérlemezkék csak az ObRb hosszú jelátviteli formáját expresszálják, míg egyik sem a rövid, nem jelzőt. Az ObRb csökkent expressziója a thrombocyta membránon és/vagy az ObRb alacsony affinitású variánsai felhasználhatók a leptin nem reaktivitásának magyarázatára. 21 Eredményeink kiterjesztik a Giandomenico et al. 21 három túlsúlyos vagy elhízott páciens létezésének bemutatásával, akiknek különböző mértékű vérlemezkeérzékenysége van a leptinre. Ezenkívül a keringő leptin és a kiválasztott metabolikus rizikófaktorok megkülönböztethetik a klasztereket, azaz hozzájárulhatnak a leptinre adott trombocita-válaszhoz kapcsolódó jelentős klinikai minták meghatározásához.

A megnövekedett derékkörfogat szorosan összefügg az inzulinérzékenység csökkenésével, 28 és a hasi zsírosság a metabolikus szindróma egyik legfontosabb kockázati tényezője. Fiziológiai körülmények között az inzulinról ismert, hogy az ADP-re és a trombinra adott trombocita-válaszok csökkentésével csökkenti a vérlemezke-aggregációt. Az inzulinrezisztens betegek vérlemezkeinek érzékenysége az inzulin vérlemezke-gátló hatásaival szemben csökkent, 33 és feltételezhető, hogy a kifejezettebb hasi zsírosodásban szenvedő betegek nagyobb inzulinrezisztenciája hozzájárulhat a leptin vérlemezkeérzékenységi profiljához. tanulmány.

A diszlipidémia szintén hozzájárulhat a vérlemezkék fokozott aktiválódásához. Kimutatták, hogy a plazma trigliceridek növelik a vérlemezkék aggregációját és a vénás tromboembólia előfordulását, míg a HDL-koleszterin ezeket a káros hatásokat megfordítja. Mivel a metabolikus szindrómát a megnövekedett oxidált kis sűrűségű lipoprotein (LDL) és a csökkent HDL koleszterinszint egyensúlyhiánya jellemzi, ez valószínűleg hipergregációt eredményez. A metabolikus szindróma diszlipidémiájának másik jellemzője a nagyon kis sűrűségű lipoproteinek (VLDL) szintjének jelentős növekedése, amelyekről kimutatták, hogy CD36 ligandum kötéssel indukálják a thrombocyta tromboxán A2 termelést. A CD36 ligand megkönnyíti a zsírsavak bejuttatását a thrombocyta tromboxánok előállításához, amelyek stimulálják a kollagén által kiváltott thrombocyta aggregációt. 38

Eredményeink nem bizonyítják, hogy a leptin-függő vérlemezke-aggregáció okozati összefüggésben van a metabolikus szindróma kockázati tényezőivel. Valójában mind a leptinre adott vérlemezke-válasz, mind a metabolikus szindróma ugyanazon betegség állapotának, azaz inzulinrezisztenciájának különböző hatásai lehetnek. Lehetséges azonban, hogy a leptin-érzékenység és a kiválasztott metabolikus kockázati tényezők együttélése jól meghatározott magas kockázatú profilt jelenthet a túlsúlyos vagy elhízott populációban járóbetegekben, és további vizsgálatokat kell végezni az ilyen összefüggés prognosztikai jelentőségének tisztázása érdekében.,

Vizsgálatunknak is vannak bizonyos korlátai. A plazma inzulin koncentrációit nem mértük. Ezért nem lehet pontosan megbecsülni az inzulinrezisztencia mértékét és annak hozzájárulását eredményeinkhez. A metabolikus szindróma kiválasztott kockázati tényezői, például a derékbőség és a trigliceridek azonban szorosan összefüggenek a csökkent inzulinérzékenységgel. 28 Továbbá, amint az egyváltozós elemzés eredményei mutatják, a klaszterek és a metabolikus szindróma bizonyos kockázati tényezői, például a derék kerülete és a HDL-koleszterin közötti kapcsolat nemlineáris lehet. Ez a probléma csökkentheti ezen változók megkülönböztető képességét tanulmányunkban. Végül a keresztmetszet kialakítása nem teszi lehetővé annak ellenőrzését, hogy a leptin-függő vérlemezke-aggregáció nő-e a fogyás, a javult leptin-érzékenység és a leptin-szint csökkenése miatt. Noha a kalóriadeficit normális testsúlyú egyéneknél nagyobb haemostaticus reakciókat vált ki a leptinre, 39 ezt a megállapítást prospektív módon meg kell ismételni túlsúlyos és elhízott betegeknél.

Összegzésként tanulmányunk azt mutatja, hogy a thrombocyta-aggregáció leptinné való képessége és a metabolikus szindróma szorosan összefügg. Vizsgálatunk további támaszt nyújt arra a hipotézisre, hogy az adipocyták és a vérlemezkék közvetlen kölcsönhatása hozzájárulhat a túlsúlyos és elhízott betegek túlzott kardiovaszkuláris eseményeinek kockázatához. A korábbi és korábbi vizsgálataink alapján ésszerűnek tűnik annak ellenőrzése, hogy a leptinre adott vérlemezke-aggregációs válasz jellemző mintázata jellemzi-e azokat a betegeket, akiknél a kardiovaszkuláris szövődmények különösen magasak.