félelem

  • elemeket
  • absztrakt
  • bevezetés
  • Anyagok és metódusok
  • résztvevők
  • anyagok
  • javaslatok
  • Pszichofiziológiai berendezések
  • genotipizálás
  • eljárás
  • 1. nap
  • 2. nap
  • 3. nap
  • elemzés
  • az eredmény
  • Újrafelvétel
  • felépülés
  • vita
  • További információ
  • Word dokumentumok
  • Kiegészítő 1–12., 14. táblázat
  • Kiegészítő 13. táblázat

elemeket

  • szorongás
  • Félelem a légkondicionálástól
  • Az idegrendszer genetikája

absztrakt

A szorongásos rendellenességek kialakulásában és fenntartásában központi szerepet játszó félelem emlékezetben való tartósan genetikailag kontrollált. Nemrégiben beszámoltak arról, hogy a konszolidációs és konszolidációs folyamatok befolyásolják a félelem memóriájának stabilitását és integritását. Ez a tanulmány megvizsgálta a konszolidációs folyamatok és a genetikai felépítés hatásait a félelem helyreállítására azáltal, hogy a konszolidációt manipulálta a kint vagy a konszolidációs intervallumban végrehajtott kihalással. A bőrvezetési válaszokkal helyreállított helyreállítás erősebb volt azoknál az alanyoknál, akik kint oltottak (6 óra), mint a konszolidációs intervallumon belül (10 perc). A hatás azonban túlnyomórészt a val158met katekol O-metiltranszferáz (COMT) funkcionális polimorfizmus val/val homozigótáiban és a szerotoninhosszúságú 5-HTTLPR polimorfizmusok rövid alléljaiban mutatkozott meg. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy az emberi félelem memóriájának konszolidációját befolyásolják a dopamin és a szerotoninnal kapcsolatos gének.

Schiller tanulmányában 9 alany fejezte be a félelem kiigazítási eljárását, hogy kísérletileg felidézze a félelem emlékét. Huszonnégy órával a kezdeti alkalmasság után az alany visszatért, és a félelem memóriáját 2 perc CS + prezentáció aktiválta UCS hiányában. Az egyik csoport 10 perccel a félelem emlékének aktiválása után, tehát szinte a konszolidációs folyamat során kihalási edzésen vett részt. A második csoport a pusztulás emlékezetének aktiválása után 6 órával, vagyis a konszolidáció befejezése után fejezte be a kihalást. További 24 órával később a félelem spontán gyógyulását tesztelték egy második kihalási teszten. Az eredmények azt mutatták, hogy az a csoport, amely az újrakonszolidációs intervallum alatt (azaz 10 perccel a memória aktiválása után) extinkciós edzést kapott, kevésbé aggódott a bőr vezetőképességi reakciója (SCR) miatt, amikor CS + -nak volt kitéve, mint az a csoport, amely 6 órán át részesült extinkciós tréningen. miután aktiválta a memóriát. A manipuláció hatása még 1 év után is fennmaradt, amikor a félelem visszatérését kipróbálták helyreállítással, ez egy olyan folyamat, amelyben a kioltott CS reakciók az USS párosítatlan előadásai után ismét megjelennek. +.

Szorongásos rendellenességek viasz és remisszió: Például poszttraumás stressz esetén a traumával kapcsolatos jelzések ismételten újraaktiválhatják az egyetlen traumás esemény okozta tüneteket. Ezenkívül a kezelés utáni remisszió mértéke nem teljes, mivel a tünetek újra aktiválódnak. Ezért klinikailag motivált annak vizsgálata, hogy a konszolidációs folyamatok nem csak a későbbi kifejeződést, hanem a félelem helyreállítását is befolyásolják-e. A félelem-kondicionálás során visszaszerezzük a második félelem-kondicionáló munkamenetet, hogy lássuk, a korábbi memória-manipulációk hogyan befolyásolják a visszatérő félelmet a feltételes ingerhez.

A félelem feltételessége egy öröklött jellemző 11, amelyet a szerotonin és a dopaminhoz kapcsolódó polimorfizmusok egyéni különbségei befolyásolnak. Különösen a polimorf régió rövid alléljének hordozói, amelyek a szerotonin transzporterhez kapcsolódnak (5-HTTLPR), erősebb felvételt és lassabb kihalást mutatnak, mint a hosszú allél homozigóták (11). 12, 13, 14 Ezenkívül az 5-HTTLPR a szorongással kapcsolatos személyiségjegyekhez, 15 a pszichopatológia fejlődéséhez 16 és a megnövekedett amygdala reaktivitáshoz, 17 a félelemkezelés kulcsszerkezetéhez kapcsolódik, 18 a félelem memória folyamatainak lehetséges kapcsolatára utal pszichopatológia és szerotonerg neurotranszmisszió.

Az állatkísérletek bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy a dopamin befolyásolja a félelem megszerzését, a kihalást 19 és a konszolidációt is. A katekol-O-metiltranszferáz (COMT) egy olyan enzim, amely szükséges a dopamin eliminálásához a prefrontális régiókban és egy funkcionális polimorfizmus val158met (rs4680), ahol a val allél magasabb COMT aktivitással társul, hatások. az egész agyban. Két tanulmány kapcsolódott a félelem kondicionálásához a COMT val158met genotípussal emberben, de vegyes eredményekkel. Lonsdorf és mtsai. 14 lassabb kihalást regisztrált homozigótákban, míg Razcka és mtsai. 23 erősebb gyógyulást regisztrált a val/met csoportban, de csak néhány dopamin transzporter (DAT1) polimorfizmus jelenlétében.

Mivel a monoaminerg genetikai polimorfizmusok modulálják a félelem kondicionálását és azt, hogy a konszolidáció hogyan befolyásolja a félelem kifejeződését, ez a tanulmány megvizsgálta, hogy a szerotoninnal és a dopaminnal kapcsolatos polimorfizmusok is befolyásolják-e a konszolidációt. E célok elérése érdekében ez a tanulmány az emberi konszolidáció károsodásának nem farmakológiai hatását használta fel Schiller és mtsai. 9 az SCR-indexelt emberi félelem helyreállításának tanulmányozására. Az a priori hipotézis szerint az újrakonszolidációs intervallum külső idején belüli kihalás veszélyeztetheti a gyógyulást, és hogy a monoaminerg gének modulálják a hatást. Ezen felül a korábban bejelentett 5, 9 konszolidációs hatást jósolták a helyreállításra.

Anyagok és metódusok

résztvevők

Összesen 66 résztvevőt (38 nő, életkor: átlag ± sd = 24, 6 ± 4, 0) vezettek be véletlenszerűen a két csoport egyikébe. Az egyik csoportban a kihalás (10 perc) belül, a másik csoportban pedig az intervallumon (6 óra) kívül a konszolidációs intervallum következett be, a félelem 2 perces emlékeztetése után. Két személyt kizártak technikai problémák miatt. Az alanyok 400 svéd koronát kaptak a részvételért.

anyagok

javaslatok

Az ingereket 17-képernyős számítógépre vetítettük az E-prime 2.0 alkalmazásával. (Psychology Software Tools, Pittsburgh, PA, USA) és egy semleges környezet fényképéből állt, amely vörös vagy kék színnel világított lámpát tartalmazott. Az egyik szín párosítva lett az UCS-sel és CS + lett, míg a másik szín párosítatlan (CS-). A CS színe egyensúlyban volt az alanyok között. Mindegyik ingert 6, 14 másodperces időközökkel jelenítettük meg a kísérletek között, amikor a környezetet kikapcsolt lámpával jelenítettük meg. A CS vége előtt 250 ms enyhe, 500 ms-os áramütést adtak le +.

Pszichofiziológiai berendezések

Az áramütéseket a PsychLabs SHK 1 fájdalomstimulátorral (Psychlab, Cambridge, MA, USA) végeztük, és maximális erejük 5 mA volt. A sokkvezetés megkönnyítése érdekében elektrolit-közeggel előállított elektródákat (EL124) műtéti szalaggal rögzítettük a résztvevők jobb alsó karjának hátuljára. Az SCR értékeket mikroszemensben mértük egy 24 bites Psychlab bőrvezető rendszer alkalmazásával, két 8 mm-es Ag/AgCl elektródot használva, amelyek izotóniás elektrolit géllel voltak feltöltve a bal kéz hipotenzív eminenciájához. 24.

genotipizálás

Az 5-HTTLPR polimorfizmust a szerotonin transzport gén promoterben 5'-ATGCCAGCACCTAACCCCTAATGT-3 'és 5'-GGACCGCAAGGTGGGGCGGGA-3' (41. bp hozam a 16. allélra és az α1a-14 ismétlés) felhasználásával amplifikáltuk. A kezdeti 15 perces denaturálási lépés után 95 ° C-on 35 ciklust hajtottunk végre, amelyek közül 30 másodpercet 95 ° C-on, 30 másodpercet 66 ° C-on és egy hosszabbítást 72 ° C-on 1 percig. A genotipizálást 2% -os agaróz géleken végeztük. A DNS-t etidium-bromiddal tettük láthatóvá. A rövid allél hordozóit (n = 46) csoportosítottuk, majd később összehasonlítottuk a hosszú allél homozigótáival (n = 16). 15, 17 Két egyénnél a génelemzés nem tudta kivonni az 5-HTTPLR genotípust.

A val/met polimorfizmust a COMT-t kódoló génben ABI 7900HT készülékkel elemeztük TaqMan assay-vel a gyártó protokollja szerint (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). A polimorfizmus funkcionalitása miatt a vallel allél 25 homozigótáját (n = 15) csoportosítottuk, majd később összehasonlítottuk met allélhordozókkal (n = 46). A génelemzés három alanynál sikertelen volt.

eljárás

1. nap

A résztvevők megalapozott beleegyezést írtak alá és meghatározták a feltétel nélküli áramütés erősségét, követve az utasításokat, amelyek szerint kellemetlen, de fenntartható. Ezután egy felvételi munkameneten estek át, amelyben 16 CS + és 16 CS- véletlenszerű sorrendben kerültek bemutatásra, azzal a megkötéssel, hogy egyetlen típusú inger sem ismétlődött egymás után több mint kétszer. A CS + mindig párosítva volt az FKR-kel. A foglalkozás után megkérdezték az alanyokat, hogy azonosítottak-e egy stimuláló, kiszámíthatatlan eseményt, és ha igen, megkérték, hogy írja le azt. A kísérleti eljárás kísérleti szorongását 1-től 10-ig terjedő skálán értékelték, egyikük "stresszmentes", 10 pedig "nagyon kétségbeesett".

2. nap

Huszonnégy órával a felvétel után a résztvevők visszatértek, az elektródákat ugyanúgy csatlakoztatták, és a memória aktiválásának megkönnyítése érdekében 2 percig CS + emlékeztetőt láttak. Az egyik csoport ezután 10 perccel a memória aktiválása után (10 perc csoport), míg a másik csoport 6 óra (6 óra) után kapott kihalást. A bukás nyolc CS + és CS- prezentációból állt. Ütéselektródákat alkalmaztunk, de ütést nem alkalmaztunk.

3. nap

Huszonnégy órával a kihalás vége után a résztvevők visszatértek helyreállítás és felépülés céljából. A helyreállítás négy CS + és CS- prezentációból állt, amelyek mindegyike négy pszeudorandom sokkot adott, körülbelül 30 másodpercenként. A helyreállítás négy CS + és CS- prezentációból állt. A CS + mindig is volt, és a CS- soha nem volt párosítva sokkkal. Sajnos egy programozási hiba miatt a helyreállítási adatok sérültek, és nem sikerült minden résztvevő számára megszerezni őket. A résztvevők egy nyálmintát hagytak a DNS-elemzéshez egy Oragene DNA Genotek nyálmintatartály segítségével (DNS Genotek, Ottawa, Ontario, Kanada).

elemzés

Az inger által kiváltott SCR-értékeket úgy számoltuk ki, hogy a bőr vezetőképességének maximális eltérését 1, 5 - 5, 75 s tartományban mértük közvetlenül az alapállapot előtt leolvasott inger megjelenését követően. 26 A CS + esetében az értékelési intervallum végpontja egybeesett az UCS megjelenésével. Valamennyi SCR-t korrigáltuk annak mértéke szerint, hogy az egyes válaszokat elosztottuk az egyes egyedek maximális eltérésével (az ingerektől és a kísérleti fázistól függetlenül). 27.

A CS + (0,23 ± 0,02) nagyobb válaszokat váltott ki, mint a CS- (0,13 ± 0,01); t (63) = 6,25 P 10-5. Mivel azonban a félelmi memóriát nem megszerző résztvevők adatait nem lehet felhasználni a konszolidációs folyamatok tanulmányozására, ezeket a témákat kizárták a további elemzésekből. Hogy megkülönböztessük azokat, akik nem kaptak feltételes választ, azoktól, akik megkapták, az egyes személyek 16 válaszát a CS + -ra és a CS-re minden egyes felvétel során párba rendezték, és a 16 delta-pontszámot a következőképpen számították ki: CS + 1 –CS - 1, CS + 2 - CS-2

CS + 16 –CS- 16. Az átlagos delta pontszámot nullával teszteltük egyfarkú t-teszttel, statisztikai P határértékkel

A megszilárdulás során a kihalás enyhíti a félelem helyreállítását. A fokozott (CS +) és a nem fokozott (CS -) jelekre adott átlagos bőrvezetési korrekciós (SCR) válaszok a helyreállítási nap során. Jelentős megkülönböztetés volt látható a 6 órás csoportban, amelyet a konszolidációs intervallumon kívül, de nem a 10 perces csoport, amely a konszolidációs intervallumon belül ment ki, ami jelentős csoport-interakcióhoz vezetett (6 óra vs 10 perc) × ingerek (CS + vs CS-) (felső panel). A hibasávok itt vannak. A csillagok jelentős különbségeket jeleznek. Kísérleti tervezés és idővonal (alsó panel).

Teljes méretű kép

A gén x csoport interakció értékeléséhez külön ANOVA-kat hajtottak végre az 5-HTTLPR és a COMT esetében, feltárva az 5-HTTLPR F gén kölcsönhatásait (s vs II vagy val/val vs met) × csoport (6 h vs 10 perc) ( 1, 28) = 10, 77, P = 0, 003 és COMT F (1, 28) = 10, 08, P = 0, 004. Az 5-HTTLPR utólagos t-tesztjeiből kiderült, hogy az általuk rövid allél hordozói kívül konszolidációs intervallumhoz képest erősebb helyreállást mutatott, t (21) = 4, 07, P

A gyógyulás konszolidációs hatását a gének modulálják. Átlagos bőr delta vezetőképességi delta pontszám (CS + mínusz CS-) a félelem helyreállítása után az 5-HTTLPR szerotonin homozigótáinak rövid allélhordozóiban és hosszú alléljaiban (II.) A belső (10 perc) és a külső (6 óra) konszolidációs intervallum alatt transzporter polimorfizmus (felső panel) és val/val homozigóta, valamint a funkcionális polimorfizmus val158 katechol O-metil-transzferáz (COMT) hordozói (alsó panel). A hibasávok itt vannak. A csillagok jelentős különbségeket jeleznek.

Teljes méretű kép

Az 5-HTTLPR csoportok esetében a rövid allélokkal (n = 23) és a hosszú allélokkal (n = 9) rendelkező homozigóta hordozók nem különböztek egymástól megszerzésükben, t (30) = 1, 10, P = 0,28 (3. és 4. kiegészítő táblázat) ), de a rövid allélokkal rendelkező hordozók 11 homozigótához viszonyítva fokozottan ellenálltak a kihalásnak, t (30) = 3,87, P 0,60; lásd a 13. kiegészítő táblázatot) a fenti összehasonlítások egyikében sem mutattuk ki (6 óra vs 10 perc, s vs 11 és val/val vs met). Azok a résztvevők, akik kondicionálást nyertek, nem különböztek genetikai összetételükben azoktól a résztvevőktől, akik nem (14. függelék táblázat).

vita

A helyreállításra gyakorolt ​​konszolidációs hatás mellett a rövid allélokkal rendelkező 5-HTTLPR hordozók lassabb kihalást mutattak, mint a hosszú allélokkal rendelkező homozigóták. Ez összhangban áll a korábbi tanulmányokkal, amelyek azt mutatják, hogy a rövid allélhordozók késleltetik a kihalást. 12, 13, 14 A konszolidációs manipuláció hatása nyilvánvaló volt a rövid allélú hordozóknál, de a hosszú allélokkal rendelkező homozigótáknál nem. A poszt-traumás stressz rendellenesség kognitív viselkedési kezelésének egy korábbi vizsgálata a hosszú allél homozigóták kezelésének jobb hatását mutatta a rövid allél hordozóival összehasonlítva. A jelenlegi eredmények azt sugallják, hogy a késleltetett kihalás és a megnövekedett félelem helyreállításának kombinációja a rövid allélt hordozó egyéneknél felelős lehet a kezelésre adott káros válaszért.

Az 5-HTTLPR működésének hátterében álló lehetséges molekuláris mechanizmusok közé tartozik az újszülött idegfejlődése során bekövetkező változások a strukturális idegrendszerben, tükrözve a szürkeállomány térfogatának különbségeit, valamint a fontos struktúrák megváltozott funkcionális összekapcsolhatósága a 31., 32. érzelmi áramkörökben, valamint az extracelluláris szerotoninszint különbségei. - rövid allélokkal és hosszú allélokkal rendelkező hordozók, amelyek feltehetően befolyásolják az 5HT1A- vagy az 5HT6-receptorokat, amelyek mindkettő társult a memória konszolidációs folyamataival. 33, 34, 35 Azok a vizsgálatok, amelyek szerint az 5-HTTLPR rövid allélhordozók in vivo valóban tartalmaznak-e több vagy kevesebb extracelluláris szerotonint, vegyes eredményeket hoztak. 36, 37, 38

Úgy tűnik, hogy dopaminra van szükség a félelem kondicionálásához. Például dopaminra van szükség a core accumbensben és a basolateralis amygdalában a félelem hosszú távú emlékeinek létrehozásához, 19 valószínűleg azért, mert a konszolidációs folyamatokhoz dopaminra van szükség. 21 Ebben a tanulmányban a rekonszolidációs manipuláció hatása a helyreállításra nyilvánvaló volt a val/val homozigóták esetében, a met hordozók esetében azonban nem. Így a val/val homozigóták hatékonyabban fenntartják és frissítik a félelem emlékeit, mint azok a met hordozók, amelyek támogatják a konszolidáció dopaminerg modulációját. A Val/val homozigótáknál megnő a D1-receptorok elérhetősége, valószínűleg a krónikus alacsony dopaminszint okozta D1-receptorok fokozott szabályozásának köszönhetően. 25, 39 A D1 és a D2 receptorok is társultak a félelem memória konszolidációjához. 40, 41 Úgy tűnik azonban, hogy a COMT polimorfizmusa nem változtatja meg a kortikális vagy sztriatális dopamin D2 receptor in vivo elérhetőségét, ami arra utal, hogy a D1 receptor aktivitása a konszolidáció feltételezett modulátora.

Ezenkívül, mivel az amygdala reaktivitása társul a 43-as félelem állapotával és a 44 poszttraumás stressz diagnózissal, és mivel az 5-HTTLPR 17 és a COMT 45, 46, 47, 48 polimorfizmusok is összefüggésbe hozhatók az amygdala aktivációjával, összefüggés lehet amygdala reaktivitás és megfigyelt konszolidációs hatások.

Ennek a tanulmánynak vannak bizonyos korlátai. Először is, a helyreállítási adatok veszélybe kerültek, és csak a résztvevők kisebbsége számára elemezhetők. Másodszor, mivel a legtöbb COMT val allél homozigóta megjelent a rövid allélek 5-HTTLPR hordozói között, nehéz megkülönböztetni az egyik genotípus és a másik hatását. Mivel azonban az 5-HTTLPR, de nem a COMT, a polimorfizmus befolyásolta a kihalást, és a COMT, de nem az 5-HTTLPR, inkább befolyásolta a gyógyulást, okkal feltételezhető, hogy e két polimorfizmus genetikai hatása különböző molekuláris mechanizmusokból fakad. Végül itt nem lehet meghatározni, hogy a helyreállítás olyan folyamat, amelyben új memória jön létre, vagy az eredeti memória helyreáll. Eredményeink azonban azt sugallják, hogy a tartós kifejeződés folyamatait mind az eredeti emlékezet tartós kifejezése, mind a félelem újratanulás útján történő helyreállítása befolyásolja.

Végül ez a tanulmány bebizonyítja, hogy az emberi memória konszolidációs folyamatait a szerotoninnal és a dopaminnal kapcsolatos gének befolyásolják.