biokémiai

  • elemeket
  • absztrakt
  • Háttér:
  • mód:
  • az eredmények:
  • következtetés:
  • A fő
  • az eredmény
  • Demográfia és táplálkozás
  • Csecsemő kobaltin és folát állapota
  • A csecsemők hematológiai paraméterei
  • vita
  • következtetés
  • mód
  • Lakossági és tervezési tanulmány
  • Vérminta és biokémiai elemzés
  • Statisztikai analízis
  • Nyilatkozat a pénzügyi támogatásról
  • közzététel

elemeket

  • anémia
  • biomarkerek
  • Táplálás
  • gyermekgyógyászat

absztrakt

Háttér:

Míg a vashiányt tekintik a csecsemők vérszegénységének fő okának, a kobalaminhiányt elsősorban a fejlődés késleltetése jellemzi, és a tipikus makrocita-vérszegénység ebben a korcsoportban súlyos és hosszú távú kobalaminhiányra korlátozódik. A hematológiai paramétereket 4 hónapos, kobalamin-károsodás biokémiai jeleit mutató gyermekeknél vizsgálták, akik 6 héten keresztül vettek részt egy randomizált, kontrollált kobalamin-intervenciós vizsgálatban.

mód:

Százhét gyermeket véletlenszerűen osztottak be intramuszkulárisan 400 μg kobalaminnal vagy beavatkozás nélkül a 6. héten. A hematológiai paramétereket, valamint a kobalamin és a folát állapotát a felvételkor és 4 hónap múlva határoztuk meg.

az eredmények:

A kobalamin-kiegészítés javította a kobalamin-károsodás összes markerét, de nem volt hatással a hematológiai sejtszámra a 4. hónapban (P> 0, 18). A vashiányos eritropoézis tüneteit 6 hét és 4 hónap után figyelték meg. 4 hónap után az alacsony vasállapot legerősebb előrejelzői a férfiak és a születésüktől számított magas százalékos súlygyarapodás voltak.

következtetés:

Azoknál a csecsemőknél, akiknél a kobalamin-funkció károsodott biokémiai jelei vannak, a pótlás nem javítja a hematológiai sejtek számát. Úgy tűnik, hogy az eritrocita-paraméterek változása elsősorban ebben a korcsoportban a vas állapotával függ össze.

A fő

A szoptatás olyan időszak, amelyet gyors növekedés jellemez, megnövekedett igényekkel néhány mikroelemre és ennek következtében az alultápláltság kockázatára (1). A túlnyomórészt szoptatott csecsemőknél a vas- és kobalaminhiányokról van szó, amelyek túlsúlyban vannak (1, 2). Míg a vashiányt a csecsemők vérszegénységének fő okának tekintik (3), a kobalaminhiányt elsősorban a fejlődés késése jellemzi ebben a korcsoportban (2, 4). A marginális kobalaminhiányban szenvedő csecsemőkről normál hematológiai értékek vannak beszámolva (5, 6), pancitopeniát és makrocita vérszegénységet figyeltek meg elsősorban súlyos és hosszú távú kobalaminhiány esetén (2).

A csecsemőtáplálás értékelése nehéz lehet az élet első hónapjaiban bekövetkező kiterjedt fiziológiai változások miatt, ami bonyolítja a normál laboratóriumi paraméterek értelmezését (2, 7). A szérum kobalamin az első hetekben jelentősen csökken és az első 6 hónapban alacsony marad, míg a szérum folát az élet első évében megnő és magas marad (8). Ezeket a változásokat a teljes homocisztein (tHcy) és a metilmalonsav metabolikus markereinek növekedése kíséri (8). A kobalamin-kiegészítés megváltoztatja a károsodott kobalamin minden jelét az idősebb gyermekeknél és a kobalamin-replikációval rendelkező felnőtteknél megfigyelt profil felé, ami arra utal, hogy a főleg szoptatott csecsemők nagy részében jelentett magas tHcy- és metilmalonsav-szint nem az éretlen anyagcserét tükrözi, hanem a rossz együttélést. -függő reakciók (9).

A hemoglobin szintézisének és az eritrociták képződésének sebessége a születés utáni első napokban drámai módon csökken, és az élet második hetében tetőzik. Az elnyomott eritropoézis és a magzati eritrociták csökkent életképessége (60–70 d) miatt a hemoglobin (Hb) szintje és az eritrociták száma eléri a legalacsonyabb értéket - születés után 2 hónappal (10, 11). Az átlagos sejttérfogat (MCV) által meghatározott eritrocita méret 6 hónapos korban csökken és a legkisebb, majd fokozatosan növekszik (10). Míg a vörösvértestek olyan általános paraméterei, mint a Hb és az MCV szintje, az eritrocita populáció átlagértékeit tükrözik, átlagos életképessége 120 d, a retikulocita hemoglobin (CHr) tartalma valós idejű értékelést nyújt az eritropoézisről az előző 24– 48 óra (12). Ez az előny teszi a CHr-t gyors fiziológiai változások idején hasznosnak, és a CHr-t a csecsemők vashiányának legjobb előrejelzőjeként tartják számon, és felülmúlja a hagyományos vas-paramétereket, mint például a szérum ferritin és a transzferrin telítettségét (7).

Korábban randomizált, kontrollált, kobalaminnal végzett vizsgálatot végeztünk túlnyomórészt szoptatott csecsemőknél 6 hetes korban, károsodott kobalaminfunkció biokémiai jeleivel (9). Ebben a cikkben beszámolunk a kobalaminpótlás hatásáról a gyermekek hematológiai paramétereire 4 hónap után. A vizsgálat célja annak megvizsgálása volt, hogy a kobalamin-károsodást jelző metabolikus profil összefügg-e a sejtvonalak hematológiai termelésével az élet első hónapjaiban.

az eredmény

Demográfia és táplálkozás

A vizsgálati csoportba 107 egészséges, 6 hetes gyermek, 56 fiú (52%) került sor, akik időnként születtek (átlagos terhességi életkor 39,9 (SD 1, 3) t.), Terhességi életkornak megfelelő súlyúak (átlag 3578 (SD 506) g). Nem találtunk szignifikáns különbséget a kobalamin és a kontrollcsoport között a csecsemők és az anyák demográfiai jellemzői szerint a befogadás és a követés során (P> 0,05), és az egész csoportra vonatkozó adatok az 1. táblázatban . Két különböző típusú, vaszal dúsított tejkészítményt (0,7–0,8 mg/100 ml elkészített tej) és kobalamint (0,13–0,2 μg/100 ml elkészített tej) dúsítottunk. Különböző típusú zagyot alkalmaztak, mindegyik vaszal dúsítva (4, 8-11, 1 mg/100 mg por). Egyetlen gyermek sem kapott további vasat.

Asztal teljes méretben

Az átlagos százalékos súlygyarapodás a születéstől számítva 39% (SD 14%) volt a 6. héten, és 95% (SD 26%) a 4. héten. Spearman korrelációja a súly százalékos növekedése volt a 6. héten (r = -0, 44, P 0,06), és nem figyeltek meg szignifikáns különbségeket a súlygyarapodás százalékában vagy az étrendben.

Az anyák átlagos életkora 31, 5 év (SD 4, 8) volt. A 104 anyából 63 többgyermekes volt, és átlagosan 1,4 gyermekük volt (tartomány: 1–4). A terhesség alatt rövidebb vagy hosszabb ideig tartó vaspótlás napi alkalmazását 104 anya közül 38 jelentette. Az anyák közül kettő vegetáriánus volt, mások szerint teljes hatású étrendet folytattak, bár kilenc anya szerint ritkán vagy soha nem evett húst (n = 6) vagy halat (n = 3).

Csecsemő kobaltin és folát állapota

A kobalamin és a folsav állapotának részletes leírását közzétették (9). 6 hét után az átlagos szérum kobalaminszint 170 (134-255) pmol/l, az átlagos plazma tHcy szint pedig 7,59 (6, 21-9, 28) μmol/l volt; a kobalamin és a kontroll csoport között nem figyeltek meg jelentős különbségeket a vitamin- és metabolitszintekben. Négy hónap elteltével a kobalamincsoport 75% -kal magasabb átlagos szérum kobalinszinttel rendelkezett a kontroll csoporthoz képest, és átlagos tHcy szintjük 39% -kal csökkent, de a kontrollokban változatlan maradt, jelezve a kobalamin kiegészítésre adott metabolikus választ.

A csecsemők hematológiai paraméterei

A Hb, MCV és CHr átlagos szintje 6 hétről 4 hónapra csökkent, miközben mindhárom sejtvonal átlagos száma növekedett; nem figyeltünk meg szignifikáns különbségeket a kobalamin és a kontrollcsoport között ( 2. táblázat ). Nem figyeltük meg a kobalamin-kiegészítés hematológiai paraméterekre gyakorolt ​​hatását (P> 0, 18 minden paraméterre, az adatok nem láthatók) egy többszörös lineáris regressziós modell alkalmazásával, amely többek között a nemet, a súlygyarapodás százalékát, a táplálkozást és a felhasználást tartalmazta. az anyai vas-kiegészítők. ( 3. táblázat ). Négy hónap elteltével a hematológiai paraméterek fő meghatározói a magas posztnatális súlyszázalék és a férfi nem voltak, amelyekhez alacsonyabb vasállapot társult, az MCV és a CHr alapján ( 3. táblázat ). 4 hónap elteltével nem figyeltünk meg szignifikáns prediktort Hb-szinten. A CHr és MCV esetében a dózisfüggő változások általános additív modell-ábrázolása százalékos súlygyarapodással a 1.ábra . A férfiaknál szignifikánsan kisebb vörösvértestek és alacsonyabb CHr volt a lányokhoz viszonyítva, 6 hetes és 4 hónapos korban ( 4. táblázat ).

Asztal teljes méretben

Asztal teljes méretben

A dózis-válasz viszony a születéstől 4 hónapig tartó százalékos súlygyarapodás között ( a ) a retikulocita hemoglobin (CHr) tartalma és ( b ) átlagos sejttérfogat (MCV) 4 hónap elteltével, általánosított additív modellek alkalmazásával. A dózis-válasz görbéket szaggatott vonalakban, 95% -os konfidencia intervallummal mutatjuk szaggatott vonalakként.

Teljes méretű kép

  • Töltse le a PowerPoint diát

Asztal teljes méretben

6 hét elteltével a retikulocitózis közvetett módon társult a Hb-szinttel (r =, 0, 62, P 0,06), szignifikáns összefüggést nem figyeltek meg. ).

A dózis-válasz viszony ( a ) hemoglobin (Hb) szintje, ( b ) átlagos sejttérfogat (MCV) és ( c ) retikulocita hemoglobin (CHr) tartalom, retikulocitaszámmal 6 héten belül általános adalék modellek alkalmazásával. A dózis-válasz görbéket folytonos vonalakban, 95% -os konfidencia intervallummal mutatjuk szaggatott vonalakként.

Teljes méretű kép

  • Töltse le a PowerPoint diát

vita

A túlnyomórészt szoptatott, koraszülött csecsemőknél, akiknek biokémiai profilja károsodott kobalaminfunkcióra utal, a kobalaminpótlás hat héten belül szignifikáns hatást gyakorolt ​​a kobalamin-státusz metabolikus markereire (9), de a 4. hónapban nem volt hatással a hematológiai paraméterekre. A magas posztnatális százalékos súlygyarapodás és a férfi nem a hematológiai paraméterek fő meghatározó tényezője volt, és alacsonyabb vasállapothoz kapcsolódtak. A retikulocitózis alacsony MCV-értékkel és CHr-értékkel társult mind a 6. hétben, mind a 4. hónapban, ami azt mutatja, hogy a vashiányos eritropoézis fennáll az élet első hónapjaiban túlnyomórészt szoptatott csecsemőknél.

A vizsgálati forma formai korlátai között szerepelt a kutatók és az anyák kobalamin-injekcióval történő elvakításának hiánya és a placebo-injekció hiánya a kontrollcsoportban. Ezeket a tényezőket azonban nem tartjuk fontosnak a gyermekek 4 hónapos hematológiai kimenetele szempontjából.

Mikrobiológiai teszteket használtak a szérum folát és a kobalamin meghatározására. Az elmúlt években gyakran alkalmazták a kompetitív lumineszcencia-kötési vizsgálatokat, de a mikrobiológiai vizsgálatot továbbra is a szérum-folát arany standardjának tekintik (13). Míg a mikrobiológiai vizsgálat meghatározza a biológiailag aktív kobalamint, a kompetitív kötési lumineszcencia vizsgálatok tartalmazzák a funkcionálisan inaktív kobalamin-analógokat is. A legújabb tanulmányok azt sugallják, hogy a kompetitív kötési lumineszcencia vizsgálatok széles körben károsodhatnak, különösen azáltal, hogy hamis normálértékeket adnak meg a kobalaminhiányban (14.

A 4. hónapban a szülés utáni súlygyarapodás és a férfi nem volt a meghatározó tényező a hematológiai paraméterekben, és mindkettő alacsonyabb vasszinttel társult. A gyors növekedés és az ennek következtében magasabb táplálkozási igények problémákat okozhatnak, ha az étrend nem optimális. Ezeknek a babáknak a többsége (70%) kizárólag születése óta szoptatott, és bár az anyatej energiában gazdag, kevés tápanyagot tartalmaz, például vasat, valamint D- és K-vitaminokat (20). Az anyatejben csökkent vas- és kobalamin-koncentrációról számoltak be laktáció alatt (21, 22), és a hosszan tartó exkluzív szoptatás a kobalamin és a vashiány fokozott kockázatával jár (23). A férfiak neme szintén elismert kockázati tényező a fiatal csecsemők vashiányában (24, 25). Beszámoltak arról, hogy a fiúknál az élet első 9 hónapjában lényegesen alacsonyabb az MCV, a Hb és a ferritin szintje a lányokhoz képest (24), de ennek a nemi különbségnek a mechanizmusa nem ismert. A nemek közötti különbség részben a fiúk nagyobb súlygyarapodásával magyarázható, amelyet tanulmányunk nem erősített meg; a férfi nem és a súlygyarapodás százalékos aránya független kockázati tényezőknek tűnt az alacsony vasállapot szempontjából.

Ezekben a kisgyermekekben a retikulocitaszám közvetetten korrelált a Hb-szinttel, és alacsony MCV-vel és CHr-rel volt összefüggésben, ami a vas által korlátozott eritropoezisre utal (26). Szemben a felnőttekkel, akiknél a vashiány miatti alacsony Hb-szint általában normális vagy csökkenő vörösvértestszámmal jár (27), magas eritrocita-számot figyeltek meg 6–48 hónapos csecsemőknél vashiányos vérszegénységben (28). Az ebben a korcsoportban megfigyelt retikulocitózis kifejezettebb volt az enyhe versus súlyos vérszegénységben, ami azzal magyarázható, hogy súlyos vashiány társul a dyserythropoiesishez, ami csökkentheti a túlélő eritrociták számát (28).

következtetés

A kobalamin károsodás biokémiai jeleivel rendelkező csecsemőknél a kobalamin-kiegészítés a 6. héten jelentős hatást gyakorolt ​​a kobalamin-státusz intracelluláris metabolikus markereire, de 4 hónap elteltével nem volt hatással a hematológiai paraméterekre. Ezekben a túlnyomórészt szoptatott csecsemőknél a magas hízás és a férfi nem volt a fő meghatározó tényező a hematológiai paraméterekben, és 4 hónap múlva alacsonyabb vasszinttel társult. A mikrotápanyagok állapotának vizsgálata fiatal, különösen szoptatott gyermekeknél indokolt.

mód

Lakossági és tervezési tanulmány

2004 decembere és 2006 áprilisa között 107 egészséges 6 hetes csecsemőt, köztük három ikerpárt és 104 anyjukat vettek fel a norvégiai Bergen helyi egészségügyi szolgálatából, és kobalamin-intervenciós vizsgálatba vonták be őket. A vizsgálati módszerek és eredmények részletes leírását közzétették (9). A hematológiai adatok 107 gyermek 6 hetes korban és 102 gyermek 4 hónapos korban álltak rendelkezésre, és ezeket a gyermekeket belefoglalták az elemzésbe.

A csecsemők és az anyák táplálkozásáról, a vitamin-kiegészítésről, a növekedési paraméterekről, a paritásról és a dohányzásról szóló kérdőívet 6 héten és 4 hónapon belül töltötték ki. Mivel az összes különféle étel- és zabkása vasat tartalmazott, a csecsemőtáplálást kizárólag szoptatott és nem kizárólagos szoptatásként határozták meg, amely magában foglalta a kombinált szoptatást és a csecsemőtáplálást, az exkluzív csecsemőtáplálást, és bármelyiket szilárd étrenddel kombinálva.

A csecsemőket blokk randomizációval 400 μg hidroxi-kobalamin (B12-vitamin raktár; Nycomed Pharma, Asker, Norvégia) (n = 54, kobalamin-csoport) vagy kezelés nélküli (n = 53, kontrollcsoport) intramuszkuláris injekcióhoz rendeltük. A vérvételért és az elemzésért felelős laboratóriumi személyzet elvakult a csoportos kijelölés miatt.

A protokollhoz etikai beleegyezést adott az Orvosi Kutatás Etikai Regionális Bizottsága, és az anyák írásbeli, tájékozott beleegyezést adtak. Ezt a tesztet a ClinicalTrials.gov, NCT00479479 számon regisztrálták.

Vérminta és biokémiai elemzés

Vérmintákat vettünk 6 hetes és 4 hónapos korban anteububális vénapunkcióval, majd EDTA Vacutainer tubusokba gyűjtöttük (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). A hematológiai paramétereket (Hb, MCV, vörösvértestek, vörösvértestek eloszlási szélessége, CHr, leukociták és vérlemezkék) 4 órán belül elemeztük automatizált hematológiai elemzővel (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). A retikulocita-indexek (retikulociták és CHr) rendelkezésre álltak a vizsgálati csoport egy alcsoportja számára (n = 62 a 107-ből 6 héten, n = 72 a 102-ből 4 hónapban és n = 58 a 102 párosított adatból 6 héten és hónapok),

Az EDTA-plazma előállításához használt vérmintákat jeges vízbe helyeztük, és a plazmát 4 órán belül elválasztottuk. A tHcy és a metilmalonsav plazmaszintjét gázkromatográfia-tömegspektrometriával elemeztük, metil-kloroformiát derivatizálásán alapulva (29). A szérumot úgy nyertük, hogy vért vákuummentes csövekbe vettünk (Becton Dickinson). A szérum kobalamint a Lactobacillus leichmannii mikrobiológiai teszttel (30), a szérum folátot pedig a Lactobacillus casei mikrobiológiai teszttel (31) határoztuk meg.

Statisztikai analízis

Az eredményeket átlagként és interkvartilis tartományként, átlagként és SD-ként jelentjük. A mediánokat a Wilcoxon-próbával hasonlítottuk össze az aláírt pozícióval és a Mann-Whitney U-próbával, ami Student t-próbáját jelenti. A kategorikus változók közötti különbségeket a χ 2 teszttel teszteltük .

Spearman-korrelációt használtunk a százalékos súlygyarapodás és a születési súly közötti kapcsolat, valamint a hematológiai paraméterek közötti összefüggések értékelésére a 6. és 4. hónapban. Számos lineáris regressziós modellt alkalmaztak a gyermek hematológiai paramétereinek (Hb, MCV és CHr) összefüggéseinek értékelésére 4 hónap múlva kobalamin-beavatkozással, a nemmel, a születéstől 4 hónapig tartó súlygyarapodás, a csecsemő táplálkozása és az anya vashasználatával. 6 hét-4 hónap.

A Hb, MCV és CHr szintek dózis-válaszának grafikus ábrázolását retikulocitaszámmal 6 héten, valamint százalékos súlygyarapodást CHr és MCV mellett 4 hónap után kaptuk általános adalék modellek alkalmazásával.

Az általánosított additív modelleket az Rc-ben (R-alapú Statisztikai Számítástechnika, 2.8.1. Verzió; Bécs, Ausztria) az mgcv-csomag szoftver (1.4-1 verzió) segítségével számítottuk ki, a többi statisztikai elemzéshez pedig az SPSS statisztikai csomagot (18. verzió) . Kétoldalas értékek P