spanyol

  • absztrakt
  • Bevezetés:
  • mód:
  • az eredmények:
  • következtetés:
  • bevezetés
  • Anyagok és metódusok
  • Tanulmányterv és tantárgyak
  • fenotipizálás
  • genotipizálás
  • elemzés
  • az eredmény
  • vita

absztrakt

Az adiponektin, a kizárólag a zsírszövet által termelt hormon, közvetett módon összefügg az inzulinrezisztenciával és a gyulladáscsökkentőkkel. Ennek a tanulmánynak az volt a célja, hogy szisztematikus genom-szkennelés segítségével kvantitatív lokuszokat (QTL) találjon, amelyek befolyásolják a keringő adiponectin szintet a VIVA LA FAMILIA vizsgálatban részt vevő spanyol gyermekeknél.

mód:

Ebbe a vizsgálatba olyan kiterjesztett családokat vontak be, ahol legalább egy túlsúlyos, 4 és 19 év közötti gyermek volt. A túlsúlyt a 95. percentilis testtömeg-indexként (BMI) határozták meg. Az éhomi vért 127 család 466 gyermekéből vették. Az adiponektint radioaktív immunvizsgálattal (RIA) teszteltük éhomi szérumban. A keringő adiponektin szintek mint kvantitatív fenotípus genom szkennelését szétszóródásos szórási megközelítéssel végeztük.

az eredmények:

A legnagyobb valószínűségi (LOD) pontszám (4,2) logaritmusát a 11q23,2–11q24,2, a második szignifikáns jelet (LOD pontszám = 3,0) a 8q12,1–8q21,3 kromoszómán találtuk. Ezenkívül egy kapcsolatot jelző jelet észleltünk 18q21, 3 és 18q22, 3 között (LOD pontszám = 2,5). A BMI-Z pontszámhoz való igazítás után a 11. kromoszómán a LOD pontszám változatlan maradt, de a 8. és 18. kromoszómán a jelek 1, 6 és 1, 7-re csökkentek. A 3. kromoszómán (LOD pontszám = 2, 1) és 10 (LOD pontszám = 2, 5) további két jelet találtunk, amely jelzi a kapcsolatot. Noha a 11. kromoszómán található régió összefüggésben áll az elhízással és a cukorbetegséggel kapcsolatos jellemzőkkel a felnőtt populációkban, ez az első megfigyelés az adiponektin kötődéséről ebben a régióban. Szuggesztív kapcsolataink a 10. és 3. kromoszómán megismétlik a többi populációban megfigyelt adiponektin eredményeket. Ebben a vizsgálatban a keringő adiponektinre gyakorolt ​​hatását a 18. és 8. kromoszómára a BMI közvetíti.

következtetés:

Gyermekgyógyászati ​​genomvizsgálatunk új QTL-eket és QTL-eket replikált kromoszóma régiókban, amelyekről korábban kimutatták, hogy felnőtteknél elhízással és 2-es típusú cukorbetegséggel (T2D) kapcsolatos fenotípusokkal társultak. A lókuszok genetikai hozzájárulása az adiponektin szintjéhez a különböző populációktól és korcsoportoktól függően változhat. A 11. kromoszómán az erős kötőjel valószínűleg azon a gén (ek) n alapul, amely (ek) hozzájárulhatnak e spanyol gyerekek túlérzékenységéhez és a T2D iránti nagy érzékenységhez.

Az adiponektin hormont kizárólag a zsírszövet állítja elő, és szenzibilizáló és gyulladáscsökkentő hatása van az inzulinra. Más zsírszövet-termékekkel ellentétben ennek a fehérjének alacsony keringő szintje az elhízással, a 2-es típusú cukorbetegséggel (T2D) és a metabolikus szindrómával jár. 1, 2 Az adiponektin, az inzulinrezisztencia és a gyulladásos állapotok között még mindig negatív összefüggésekről számoltak be. 1 Ez az utóbbi két állapot fogyás után javul, az adiponektin szintjének egyidejű növekedésével. Az adiponektin szerkezete hasonló a tumor nekrózis faktorához, és úgy tűnik, hogy anti-szabályozó hatású e gyulladásgátló citokin szempontjából. 4 Amint azt felnőtteknél megfigyelték, az elhízott gyermekek és serdülők alacsonyabb adiponektinszinttel rendelkeznek, mint normál testsúlyú társaik, és a szérum adiponektin pozitívan korrelál az inzulinérzékenységgel és a nagy sűrűségű lipoproteinnel, valamint negatívan a proinzulin/proinsulin/éhomi inzulin arányával. 5 Reinehr és munkatársai tanulmánya. 6 megállapította, hogy a gyermekek fogyása a keringő adiponektin markáns növekedésével és az inzulinrezisztencia csökkenésével jár.

Ez a tanulmány az első kötő elemzés a keringő adiponektin-szintekről a gyermekeknél. Ennek a tanulmánynak az volt a célja, hogy szisztematikus genom-szkennelés segítségével kvantitatív lokuszokat (QTL) találjon, amelyek befolyásolják a keringő adiponectin szintet a VIVA LA FAMILIA vizsgálatban részt vevő spanyol gyermekeknél.

Anyagok és metódusok

Tanulmányterv és tantárgyak

Az éhomi éhomi szérum adiponektint befolyásoló genetikai és környezeti tényezőket 1030-ból 466 gyermek részmintájában vizsgálták, akiket beiratkoztak a VIVA LA FAMILIA vizsgálatba, amelynek célja a gyermekkori elhízás genetikai feltérképezése volt a spanyol populációban. Minden családot túlsúlyos probandumban azonosítottak 4 és 19 éves kor között, kétkomponensű szűrőrendszer alkalmazásával (azaz a testtömeg-index (BMI) 95. percentilis és a zsírtömeg 85. percentilis). A túlsúlyos szondával, valamint a 4–19 éves testvérekkel és szüleikkel való azonosulás után meghívást kaptak a Gyermektáplálkozási Kutatóközpontba a vizsgálat áttekintése és teljes magyarázata céljából. Minden gyermek és szüleik írásos tájékozott beleegyezést adtak. A protokollt a Baylor Orvostudományi Főiskola és a hozzá tartozó kórházak humán alanyok kutatásának intézményi felülvizsgálati bizottsága hagyta jóvá.

A túlsúlyos szondát és az összes testvért testtömeg és endofenotípus jellemezte, amelyek az elhízás kialakulásához kapcsolódtak. Itt mutatjuk be az adiponektin szintet mint fenotípust alkalmazó kötés elemzésével kapcsolatos eredményeinket.

fenotipizálás

A testtömeget digitális mérleggel mértük és 0,1 kg pontossággal regisztráltuk. és 1 mm-es pontossággal mértük a magasságot sztadiométerrel. Az éhomi szérum adiponektin szinteket radioimmunassay (RIA) módszerrel mértük (Linco Research Inc., St. Charles, MO, USA).

genotipizálás

A törzskönyvi hibákat a PERST (Pedigree Relationship Statistical Tests) 16 alkalmazásával fedezték fel, amelyek valószínűség-alapú statisztikák megosztását használják az allélok azonosítására (IBD) a genomban. A törzskönyv hibáit úgy oldották meg, hogy a meglévő törzskönyv szerkezetét olyan változtatásokkal hajtották végre, amelyek a legkevesebb feltételezést igényelték, és amelyek összhangban voltak a genetikai adatokkal. A mendeli inkonzisztenciákat és hamis kettős rekombinánsokat eredményező SimWalk2 17 genotípusok használatát eltávolítottuk, ha a laboratórium nem oldotta meg. A Loki 18 segítségével számoltuk ki a kötéselemzéseinkhez szükséges IBD mátrixot. Mindhárom program, a PERST, a SimWalk2 és a Loki, információt igényel a jelek közötti relatív távolságokról. A Marshfieldi Orvosi Genetikai Központban kapott szexuálisan átlagolt kromoszóma térképeket használtuk.

elemzés

A szóráskomponens modell segítségével teszteltük azt a nullhipotézist, miszerint a QTL (σ q 2) miatti additív genetikai szétszóródás egyenlő nulla vagy a kötődés hiányával, összehasonlítva ennek a korlátozott modellnek a valószínűségét annak a modellnek a valószínűségével, amelyben σ q 2 becsült. A két log 10 valószínűség közötti különbség LOD pontszámhoz vezet, amely megegyezik a kötési elemzés klasszikus LOD pontszámával. E modellek logaritmikus valószínûségének különbsége kétszer olyan vizsgálati statisztikát eredményez, amely aszimptotikusan oszlik el a χ 2 változó és az 1df változata és a nulla ponttömeg keverékeként. 19.

A genom szkennelését SOLAR-ban végeztük, az adiponektin szintjét fenotípusként és nemként, életkorként, 2 éves korként, valamint ezek kölcsönhatásait kovariátorként használva. A LOD-pontszám empirikus beállítását Blangero és mtsai. A BMI-Z pontszám hatását úgy vizsgáltuk, hogy kovariátként szerepeltettük és megismételtük a genom vizsgálatot. A helyzetjelölt gének szempontjából vizsgált kromoszóma régiót 1 LOD pontszám támogatási intervallumaként határoztuk meg. A helyzetjelölt gének kiválasztását az NCBI térképböngésző adatbázisának felhasználásával végeztük.

az eredmény

Asztal teljes méretben

Asztal teljes méretben

Az éhomi adiponektin láncdiagramja spanyol gyermekeknél nem, életkor és életkor szerint kovariátorként. A LOD-pontszámokat empirikusan szimulációk segítségével állítottuk be.

Teljes méretű kép

Miután beállítottuk a BMI-Z pontszámot (2. ábra), a 11. kromoszómán a jel változatlan maradt; a jel azonban a 8. és 18. kromoszómán 1, 6 és 1, 8 LOD-pontszámig csökkent. A 3. és 10. kromoszómán további két régiót találtunk a kötődés jelzésére. A 3. kromoszómán szuggesztív kötődést találtunk a D31285 és D3S1271 markerek (100-130 cM) között, 2,1-es LOD-pontszámmal, a 10-es kromoszómán pedig jelet találtunk a D10S547 között. és D10S197 (29, 15 - 52, 0 cM) 2, 5 LOD-pontszámmal. A 3. ábra a markerek eloszlását és a genom második szkennelését mutatja a 11. kromoszómán. 5q (1,4), 19q (1,5) és 20q (1,4).

Kovászként összehasonlítjuk az éhező spanyol gyerekek éheztetési adiponektinjének sémáit, nem, életkor, 2 éves kor és BMI-Z felhasználásával. A LOD-pontszámokat empirikusan szimulációk segítségével állítottuk be.

Teljes méretű kép

Jelek a 11. kromoszómán.

Teljes méretű kép

vita

A mai napig kevés összehasonlító vizsgálatot végeztek a gyermekkori elhízásról és a kapcsolódó fenotípusokról. Ez a tanulmány a gyermekek adiponektinszintjének első genomiális keresését jelenti. Ennek a populációnak nagy a kockázata az elhízással kapcsolatos társbetegségek, például a T2D kialakulásának. Ebben a tanulmányban a gyermekek jelentős metabolikus rendellenességeket mutattak ki a túlzott zsírbetegséggel kapcsolatban, amint azt korábban leírtuk. Tekintettel a böjt szérum adiponektin magas öröklődésére és az inzulinrezisztenciával, a diszlipidémiával és a vérnyomással való kedvezőtlen összefüggésre a VIVA LA FAMILIA vizsgálatban, 7, 21, valamint az elhízás és a T2D magas gyakoriságára az amerikai spanyol populációban, 22 arra törekedtünk, hogy azonosítsa a genetikai lókuszokat az adiponektin keringésére spanyol gyermekeknél. Korábbi vizsgálatok felnőtteknél szignifikáns kötődést találtak az adiponektinhez (3. táblázat). 11., 12., 13., 14. Ez az elemzés a 11., 8. és 18. kromoszóma három új régióját azonosította a spanyol gyermekek adiponektinszintjével, és a 3. és 10. kromoszóma két régióját replikálta felnőtteknél.

Asztal teljes méretben

A legerősebb kötődésünk az éhomi szérum adiponektinhez a 11. kromoszómán volt, és erőssége nem változott a BMI-Z pontszám kiigazítását követően. Noha ez az első azonosítás az adiponektin kötőjelének a 11. kromoszómán, ez a kromoszóma régió összefügg az elhízással és a cukorbetegséggel kapcsolatos jellemzőkkel (4. táblázat). Stein és mtsai. 23 a metabolikus szindróma öt komponensének felhasználásával enyhe bizonyítékot mutatott a 11. kromoszómán való kapcsolatra a D11S2008 marker közelében). Elemzésük megerősítette más kutatók megfigyeléseit, akik jelentős kapcsolatról számoltak be a testmérettel, 24 diabetes mellitus 25-tel és 26 inzulinrezisztenciával a 11q kromoszómával szemben. Van Tilburg és mtsai testvérek vizsgálatában a T2D-ben szenvedő betegek elhízásában jelentős kötődést tapasztaltak a 11q kromoszómához. 27 A régió finom feltérképezése után LOD 2, 4 pontszámot találtak a 11q14 - q24 kromoszómán, BMI-t használva fenotípusként.

Asztal teljes méretben

Asztal teljes méretben

Genomvizsgálatunk megismételte a felnőttek kapcsolati eredményeit. Az adioponektin 3. kromoszómáján lévő QTL-ről korábban 13 felnőtt indián és hawaii japán számolt be. Vizsgálatunkkal ellentétben a BMI kiigazítása nem változtatta meg a LOD-pontszámukat. Más fenotípusok, például a BMI és a vérnyomás társultak a 3. kromoszóma ezen régiójához. 36, 37 A 10. kromoszómán elhelyezkedő régió összefüggésben áll a pima indiánok, 13 észak-európai származású fehér amerikai 11 adiponektinszintjével és a régi amish renddel. 12 Ezen túlmenően számos tanulmányról - köztük a gyermekek és serdülők esetében végzett korábbi kutatásokról - beszámoltak, hogy összefüggésben vannak más, az elhízással járó fenotípusokkal ebben a kromoszóma régióban. 38

A D8S1771 és D8S1784 markerek között a 8. kromoszómán talált régió szignifikáns kötődést mutatott a BMI 39 és a leptin fenotípusokhoz. 40 Frayling és munkatársai tanulmánya. 41 az Egyesült Királyságban végzett tanulmányban azonosított egy lokuszt a 8q21 kromoszómán, a T2D korai megjelenésével társítva.

A 18. kromoszómán lévő régiót összefüggésbe hozták a BMI-vel egy korábbi, észak-európai származású kaukázusi tanulmányban. 9 Chuang és mtsai vizsgálata. 14 szignifikáns kötési jelet azonosított az adiponektin szintjéhez a hawaii japán populációban a 18p és 15p kromoszómán (6. táblázat). A 18. kromoszómán a jelek 24 és 41 cm-nél helyezkedtek el, és nem fedik át a vizsgálatunkban talált területet. Ez a tanulmány arról számolt be, hogy a 18. kromoszómán a LOD pontszám változatlan maradt az életkor, a nem és a BMI igazítása után, míg a 15. kromoszómán a jel 3,19-ről 1,31-re csökkent, ami arra utal, hogy ennek a QTL-nek az előnye testtömeg által közvetíthető. 13 Ohman és mtsai. A 42. szuggesztív kapcsolatot mutat ezen a területen, az elhízást fenotípusként alkalmazva. Ez a terület társul a kaukázusiak légzési hányadosával 43 és az éhomi glükózzal. A 8. és 18. kromoszómán talált kromoszóma-régiók 44 LOD-pontszáma jelentéktelen értékekre esett, miután a BMI-Z-pontszámhoz igazodtak, érdekes módon mindkettő összefüggött ezzel a tulajdonsággal a felnőtteknél végzett korábbi vizsgálatokban.

Asztal teljes méretben

Röviden, a jelenlegi kutatások új kromoszómarégiókat azonosítottak a 11., 8. és 18. kromoszómán keringő adiponektin-szintekkel kapcsolatban, ami a 3. és 10. kromoszómához való kötődést sugallja. Az utóbbi két ismétlődő eredmény más populációkban. Az ebben a vizsgálatban azonosított összes kromoszóma régió az elhízással és a cukorbetegséggel kapcsolatos fenotípusokkal társult különböző etnikai csoportok felnőttjeiben. Ezeknek a régióknak a további finomhangolása lehetővé teszi a keringő adiponektinszintet befolyásoló genetikai polimorfizmusok azonosítását.