táplálkozás

  • absztrakt
  • A fő
  • ANYAGOK ÉS METÓDUSOK
  • Állatok és vizsgálati protokoll.
  • Probiotikumok.
  • Strave.
  • Súlygyarapodás és gyarapodás.
  • Plazma glükóz, inzulin, aminosavak, karbamid és kortizol.
  • Infúzió és aminosav elemzés.
  • A transzlációs iniciációs faktorok és az összes ubiquitinizált fehérje elemzése.
  • Statisztikai analízis.
  • AZ EREDMÉNYEK
  • Súlygyarapodás és növekedés.
  • Plazma glükóz, inzulin, kortizol, aminosavak és az egész test fehérjeforgalma.
  • Vázizom fehérjeszintézis, transzlációs iniciációs faktorok és ubiquitinált fehérjék.
  • A plazma leucinek összefüggései.
  • VITA
  • szójegyzék

absztrakt

A fő

Különféle eszközök alkalmazhatók a fogyás megelőzésére, beleértve az anabolikus gyógyszereket és/vagy az enterális táplálkozást (11). E stratégiák célja az anabolikus állapot fenntartása a PS stimulálásával és a proteolízis minimalizálásával. Vázizom szempontjából ezek a megközelítések stimulálják a fehérje transzlációjának megindítását az mTOR által, csökkentik a proteolitikus aktivitást (különösen az ubiquitin által közvetített proteolízist) vagy mindkettőt. Ez a sejthatás ezután a frakcionált vázizomszintézis (FSR) sebességének növekedésévé, valamint a normális növekedés és az izomtömeg fenntartásaként jelentkezik.

Az enterális táplálkozás hatékony lehet az izomveszteség megelőzésében és az IBD növekedésének korlátozásában azáltal, hogy növeli az inzulin által közvetített sejtjeleket, amelyek elindítják a PS-t, vagy közvetlenül növelik a tápanyagok elérhetőségét. A megemelkedett plazma aminosavak, különösen a leucin, anabolikus hatásai jól ismertek, és egészséges (12, 13) és "szeptikus" malacokban (14) egyaránt bizonyítottak. Egy nemrégiben végzett klinikai tanulmány azt is kimutatta, hogy a hiperinsulinémia és a betegség remissziója Crohn-betegségben vagy fekélyes vastagbélgyulladásban szenvedő felnőttekben összefüggésben van (15). Ezért az energiahiány ellenére állandó tápanyagellátással fenntartható a növekedés és a PS.

Korábban megmutattuk ugyanazokban a malacokban, amelyeket ebben a tanulmányban használtak, hogy a probiotikus kiegészítés növelte a máj és az albumin szintézisében a PS-t, de nem befolyásolta a betegség súlyosságát vagy a vastagbélben a PS súlyosságát (16). A PS-stimulált máj váratlan megállapítása alapján arra összpontosítottunk, hogy megvizsgáljuk, vajon a probiotikumok hasonló anabolikus hatást váltanak-e ki a vázizomzatban, hogy enyhítsék az izompazarlást, ami az IBD-ben bekövetkezett csökkent táplálékfelvételhez és gyulladáshoz kapcsolódik. Mások kimutatták, hogy a probiotikus kiegészítés az IBD potenciális kiegészítő terápiája mind felnőtt, mind gyermek IBD-ben (17–19). A probiotikumok legtöbb klinikai vizsgálata azonban a tünetek kezelésére és a remisszió kiváltására összpontosított, de nem a táplálkozási állapotra.

Ezért ez a tanulmány megvizsgálta a tartós enterális táplálékbevitel hatását megfelelő makrotápanyagok bevitelével, 50% -os makrotápanyag-szükséglettel vagy 50% -os probiotikus pótlási szükséglettel akut vastagbélgyulladás esetén. Állandó táplálási megközelítést alkalmaztunk az inzulin és az aminosavak koncentrációjának növelésére. Az inzulin és a leucin által közvetített sejtjelzés tartós stimulálása várhatóan a tiszta anabolikus sejtes folyamatokat stimulálja. Ezért hipotéziseink szerint 1) a megfelelő tápanyagbevitel fenntartása megakadályozná a növekedés károsodását és fenntartaná a PS izomszintjét, és 2) a probiotikus alkalmazás nem csökkentené az izomnövekedés és a PS csökkenését az étrendi korlátozás hatására a malac vastagbélgyulladás modellben.

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Állatok és vizsgálati protokoll.

Probiotikumok.

A C-MRP malacok 450 x 109 CFU VSL # 3-at (VSL Pharmaceuticals, Gaithersburg, MD) kaptak 1 csomag/nap 30 ml étrendben, 15 ml naponta kétszer). Az adag rágcsálókon és emberen végzett vizsgálatokon alapult, amelyek során a testtömeg (0, 73) értékét használták az anyagcsere-testméretek (22-24) közötti skálázáshoz.

Strave.

Laboratóriumunkban tojásalbuminon és tejsavófehérjéken alapuló étrendeket állítottak össze, amint azt már említettük (16). A diétákat naponta 16 órán át infúzióval kezelték (Compat Feeding Pump; Novartis Nutrition, Kanada), hogy 24 órán át 300 ml/kg-ot juttassanak el a gyomor-katéteren keresztül, 925 kJ · kg -1 -1 d -1 táplálkozási energia bevitelének elérése céljából./C-WN és a 461 kJ · kg -1 -1 d -1 ajánlott dózis 50% -a C-MR/C-MRP malacok esetében (25, 26). A bevitelt naponta súly szerint állítottuk be, és a korlátozott étrend 50% -át kiegészítettük, hogy ugyanaz a mikroelem-bevitel maradjon, mint a REF és a C-WN csoportokban, hogy elkerüljük a növekedést, a PS-t vagy a gyulladás súlyosságát befolyásoló mikroelem-hiányokat.

Súlygyarapodás és gyarapodás.

A seb hosszát és a mellkas kerületét altatásban mértük a kiinduláskor és a 14. napon. A testtömeget naponta mértük.

Plazma glükóz, inzulin, aminosavak, karbamid és kortizol.

A metabolitokat a 14. napon összegyűjtött plazmában mértük az indikátor infúzió 6 órájában. Az inzulint a sertés inzulin RIA-jával mértük (Linco Research, MO). A glükózt glükóz-oxidáz (GM7 Micro-Stat, Analox Instruments, MA) alkalmazásával határoztuk meg. Az aminosavakat reverz fázisú HPLC-vel (Beckman Coulter) határoztuk meg az o-ftalaldialdehid automatizált derivatizálása után egy előoszlopban (27). A karbamidot és a kortizolt automatizált klinikai biokémiai analizátorral mértük (Hitachi 911 modell, ON, Kanada).

Infúzió és aminosav elemzés.

Az 1- [gyűrű-2H5] fenilalanint (98% -ban dúsítva) elsődleges (35 μmol/kg) állandó infúzióként (35 μmol · kg -1 -1 h -1) 6 órán át telítettséggel adtuk a 14. napon. az infúzió során az alapvonalon és óránként húzták. A gyorsan rángató glikolitikus és lassan rángató oxidatív izomrostokat képviselő longissimus dorsi (LD) és izomrostokat azonnal eltávolítottuk, miután a malacokat nátrium-pentobarbitállal leöltük. A plazmában és az izmokban lévő aminosavakat (n-propil-észter-heptafluor-butiramid-származékok) a korábban leírt módon állítottuk elő (20). A fenilalaninban való dúsulást negatív kémiai ionizációs gázkromatográfia-tömegspektrometriával (Hewlett Packard Model 5988A, CA) elemeztük, az ionok [M-FH] monitorozásával 383 és 388 tömeg/töltés arány mellett, amely megfelel a nem jelölt és jelölt ionoknak. Mutató: a nyomarányokat meghatároztuk a nyers ion mennyiségével, valamint a mutató és a fenilalanin természetes mennyiségének elemzésével (16, 20).

A fenilalanin fluxust a marker trombocitahígításából számítottuk ki a fenilalanin csoportban, a fentiek szerint (16). A teljes test fehérjeforgalmát a fenilalanin áramlásából számítottuk ki a malacok fenilalanintartalma (3,7 g/100 g) alapján (28). A kevert fehérjék FSR-jét az LD-ben és a maszterben meghatároztuk a fehérjéhez kötött fenilalanin-dúsítás növekedési ütemének viszonyában az intracelluláris szabad tartály fenil-alanin-dúsulásával szemben (20). A fenilalanin dúsítását vegyes plazmafehérjékben kezdetben a kiindulási vagy kiindulási izomfehérje-dúsítás helyettesítésére használták.

A transzlációs iniciációs faktorok és az összes ubiquitinizált fehérje elemzése.

A transzlációs iniciációs faktorok aktivációjára gyakorolt ​​étrendi és probiotikus hatások értékeléséhez csak LD mintákban vizsgáltuk az mTOR és szubsztrátjainak, a p70S6K1 és 4E-BP1 foszforilációját. A fagyasztott LD mintákat a fent leírtak szerint dolgoztuk fel az eIF4E * 4E-BP1 komplex és foszforilált Akt, mTOR, S6K1, valamint az S6, eIF4E, 4E-BP1 (27, 29, 30) riboszomális fehérje elemzéséhez. Az ubiquitin által közvetített proteolízis indexeként az összes ubiquitinált fehérje szintet meghatároztuk LD mintákban immunoblotolással, a korábban leírtak szerint (27).

Statisztikai analízis.

Az összes adatot SPSS 11.0 verzióval (SPSS Inc., Chicago, IL) elemeztük, és átlag ± SEM értékként jelentettük. A napi súlygyarapodást ismételt ANOVA mérésekkel elemeztük. A folyamatos változókat egyirányú ANOVA-val elemeztük, majd posthoc legkisebb négyzetkülönbséggel és Dunnett-féle teszttel végeztük a csoport-összehasonlításokat, a C-WN csoportot használva összehasonlító csoportként és p

A malacok napi testtömege. REF, fekete négyzetek; C-Ny-i, nyitott háromszögek; C-MR, nyitott gyűrűk; C-MRP, szürke négyzetek. Átlag ± SEM, n = 8; * o

A vázizom fehérje szintézisének sebessége. LD FSR (fekete sávok) és tömeges FSR (fehér sávok). Átlag ± SEM, n = 8; * o

A - D panelek, Az mRNS és az ubiquitinizált fehérjék transzlációjának molekuláris kontrolljai. A, relatív foszforilezett Akt (fekete sávok) és mTOR (fehér sávok). B, relatív foszforilezett 4EBP1 (fekete oszlopok) és eIF4E * 4E-BP1 komplex (fehér oszlopok). C, relatív foszforilált p70S6K1 (fekete oszlopok) és riboszomális fehérje S6 (fehér oszlopok). D, viszonylag teljes ubiquitinizált fehérje. Átlag ± SEM; * p -1 -1 d- 1) és a p70S6K1 foszforilált szintje (r = 0, 45, p

A plazma leucin-koncentráció (μmol/l) Pearson-korrelációja az (A) súlygyarapodással (g · kg -1 -1 d- 1; r = 0, 46, p C-MR

macitis korlátozott makrotápanyagokkal

makrotápanyag-korlátozott vastagbélgyulladás és probiotikumok