absztrakt
Az antimikrobiális szerek által az anyatejben nyújtott passzív védelem nagy része az IgA szinte kizárólag dimer vagy szekréciós formában való jelenlétének köszönhető (16). A legmagasabb koncentrációban a születést követő első napokban van jelen (a kolosztrumban), majd fokozatosan csökken, 0,2–0,3 g/l alapszintig (13, 14). Az sIgA jobban ellenáll a savas körülményeknek és a bélenzimek proteolitikus aktivitásának, mint a szérum IgA (17), és a székletben jelentős mennyiségben épnek találják (17, 18). A bevitt IgA cselekvési helyei korlátozottak, mivel előfordulhat, hogy ez az Ig nem szívódik fel jelentős mennyiségben a bélrendszerből (19). A tej bebizonyosodott, hogy a születése után 18–24 óráig rövid ideig felszívódik (18), bár a baba jelentősége nem ismert.
Az anyatejben számos sIgA antitestet írtak le olyan általános élelmiszer-antigének, baktériumok és vírusok ellen, amelyeknek az anya ki volt téve (13, 14, 20-22). Ezek az antitestek különösen fontosnak tűnnek az élet első néhány napjában, amikor a gyermekek IgA nyálkahártya-termelése nem kielégítő (21, 23). Lenyelés után az anyatejjel szembeni IgA antitestekről úgy gondolják, hogy passzívan védik a babát azáltal, hogy az enterociták luminális felületén lévő IgA receptorokhoz kötődnek, ezáltal csökkentik vagy megakadályozzák az éretlen gasztrointesztinális epitheliumon keresztüli antigén bejutást (24). Walker és mtsai kísérleti modelljében. (25) kimutatták, hogy a bél antitestek megakadályozhatják a natív fehérjék reszorpcióját, és ehelyett növelhetik a lebomlott anyag felvételét, feltehetően antigének megkötésével és bélenzimeknek való kitettséggel. Az IgA antitestek szerepet játszhatnak a potenciális ételallergének kiválasztásában az emberi tejből azáltal, hogy olyan immunkomplexeket képeznek, amelyeket az emberi tej makrofágjai fagocitálhatnak (24). Korábbi előzetes vizsgálatokban olyan anyák kolosztrummintái voltak, akiknek újszülöttjei később a CMA jeleit mutatták (13) vagy orális CMA (14), alacsony az összes IgA (13, 14) és alacsony a specifikus tehéntej IgA szintje (13).
Ennek a vizsgálatnak az volt a célja, hogy meghatározzuk a teljes IgA-tartalmat a tejben és a tehéntejet a kolosztrumban és az emberi tejben, a csecsemők CMA későbbi kialakulásához viszonyítva.
mód
Tárgyak.
Az étrendbe olyan csecsemőket és csecsemők anyáit vonták be, akiknek ételallergiára utaló tünetei vannak: olyan ételeket, amelyekről feltételezhető, hogy tüneteket okoznak a csecsemőknél, pl. A tehéntejet, a gabonaféléket (rozs, búza, zab és árpa), a tojást és a halat kizárták az anya és a baba étrendjéből. Az egészséges gyermekek életkorának megfelelő étrendet folytattak. Valamennyi atópiás anya tünetmentes volt (szénanátha, ekcéma, csalánkiütés vagy asztma nélkül) a szoptatás ideje alatt. Az anyáknak nem volt gyógyszerük a vizsgálat során, és kizárták azokat, akiknek az elmúlt 4 hétben tőgygyulladása volt.
A vizsgálati protokollt a helsinki központi kórház bőr- és allergiás kórházának és Helsinki városának etikai bizottságai hagyták jóvá. Az anyák tájékozott beleegyezését kapták az anyatej-minták gyűjtéséhez és gyermekeik hosszú távú nyomon követéséhez.
Bőrvizsgálatok.
A bőrszúrási teszteket kereskedelmi tehéntej-kivonattal (Soluprick, Allergologisk Laboratorium A/S, Horsholm, Dánia) végeztük az alkar hasi oldalán, 1 mm-es, egycsúcsú, karos lancettel. Hisztamin-dihidrokloridot (10 mg/ml; Soluprick) használtunk pozitív kontrollként. A reakciók 15 perc elteltével vörösek voltak, és pozitívnak tekintették őket, ha az átlagos hajátmérő ≥ 3 mm, a negatív kontroll 0 mm és a pozitív kontroll ≥ 5 mm volt.
Tehéntej és gabonafélék jegyzőkönyve.
Emberi tejminták gyűjtése.
Az első anyatejet az anyáktól vették a születés utáni első 2 hétben, majd a csecsemő 1, 3 és 6 órás korában. További mintákat vettünk a CMA tüneteinek megjelenésekor. Hét anyánál minden harmadik napon gyakran vettek tejmintákat, hogy meghatározzák az emberi tej IgA szintjének pontos lefolyását. A szoptatás során átlagosan 2,6 mintát nyertünk anyánként (1 és 12 közötti tartomány).
A melleket meleg vízzel mostuk, mielőtt a tejet kézi szívószivattyúval összegyűjtöttük. Közvetlenül a begyűjtés után 20-50 ml emberi tejmintákat 1400 x g-vel szobahőmérsékleten 15 percig centrifugáltunk a zsírréteg elválasztása céljából. Ezt követően a zsírt eltávolítottuk, a felülúszót összegyűjtöttük, fagyasztottuk és -70 ° C-on tároltuk az emberi anya IgA további meghatározásáig.
Az emberi tej összes IgA és IgA antitestjének kimutatása tehéntejjel szemben.
Felolvasztás után az emberi tejmintákat 1: 5 arányban hígítottuk PBS-ben (pH 7,4), amely 0,05% Tween 20-at tartalmazott. A zsíros réteg fennmaradó részét 17 000 x g-vel 10 percig, 4 ° C-on centrifugálva távolítottuk el. meghatározzuk a tehéntej IgA antitestjeit, és az összes IgA méréséhez tovább hígítsuk 1: 2 arányban. Az összes anyatej IgA-t radiális immundiffúzióval határoztuk meg LC-Partigen IgA immunodiffúziós lemezekkel, N Protein Standard SL kalibrátorként a gyártó utasításai szerint (Dade Behring, Marburg, Németország). Az eredményeket gramm/literben fejezzük ki.
Statisztikai analízis.
Az eredményeket egy tapasztalt statisztikus elemezte. Az adatokat ANOVA alkalmazásával elemeztük ismételt mérésekhez, anyákkal mint klaszterekkel. Mivel az IgA-tartalom torz volt, a modell felszerelése előtt logaritmikus transzformációt alkalmaztunk az IgA-értékekre. Mivel az IgA-tartalom kezdetben gyorsabban, majd majdnem egy szinten csökken, magyarázó változóként a gyermek életkorának logaritmusát használták. Az elemzés során az alapmodell a következő volt: ln (életkor) mint véletlenszerű és rendszerrész; ln (IgA) n ln (életkor) * (1 galéria + 1 anya-atópia + 1 szimpatoma), ahol 1 karakter egy karakter mutatóváltozója. A jelentéktelen kifejezéseket (szignifikancia> 5%) kizártuk. A modelleket az ANOVA hasonlította össze. Az életkori különbségek statisztikai szignifikanciájának meghatározásához Kruskal-Wallis tesztet alkalmaztunk.
Az arányok közötti különbségek meghatározásához a χ 2 tesztet használtuk. Az elemzéseket S plus 4 szoftverrel (MathSoft, Inc., Seattle, WA, USA) és StatView 4.0 szoftverrel (Abacus Concepts, Inc., Berkeley, CA, USA) végeztük.
AZ EREDMÉNYEK
A vizsgált populáció klinikai jellemzői.
A nyomon követés során 48 anyának (69% atópiás alkatú) volt olyan gyermeke, akinek klinikai expozíciója volt tehéntejjel (14 gyermeknek elhúzódó kólika volt a kórelőzményében), nyolcnak (38% atópiás alkatú gyermeknek) volt olyan gyermeke, akinek hosszan tartó infantilája volt. kólika, de a tehéntej negatív provokáló dózisa volt (betegség kontrollcsoport), 31-nek (23% atópiás alkatú) egészséges gyermeke volt. Kimutatták a rozs, búza, zab és árpa iránti túlérzékenységet CMA-ban szenvedő 48 gyermekből 32-ben (67%). Az exkluzív szoptatás időtartama összehasonlítható volt CMA-val rendelkező csecsemőknél, medián 3,5 hónap (0-7 hónapos tartomány); a betegség kontroll csoport csecsemőinél a medián 3,0 hónap volt (tartomány: 1 hét és 6 hónap); és egészséges csecsemőknél a medián 3,0 hónap volt (tartomány: 1 hét és 6 hónap). A 48 CMA-ban szenvedő gyermek közül 35 (73%) kizárólag szoptatott a CMA tüneteinek idején. A medián életkor a CMA tüneteinek idején 1,3 hónap volt (tartomány 4 d-től 4 hónapig), a klinikai vizsgálat idején pedig 4,9 hónap (tartomány: 4,0-5,9 hónap). Az anya atópiás felépítése korrelált a csecsemők CMA-fejlődésével (p = 0 0003; χ 2 teszt).
A tehéntej bőrtesztére adott válasz 48 CMA-ból 15-ből (31%) volt pozitív. A tehéntej klinikai felhívása során 26 (54%) csecsemőnél azonnali és 22 (46%) késleltetett válasz jelentkezett. Tizenkét gyermeknek helyi csalánkiütése volt, miután egy csepp tehéntejet felhordtak a bőrükre vagy az ajkukra. A másik 20 gyermek közül ekcéma volt, ötnél gyomor-bélrendszeri tünetek jelentkeztek, 11-en pedig mind a bőrre, mind a gyomor-bélrendszeri száj tehéntejére reagáltak. A CMA egyéb tünetei mellett négy gyermeknek felső légúti tünetei voltak (akut középfülfertőzés, allergiás nátha vagy zihálás).
Az anyatej teljes és specifikus IgA-szintje.
A kolosztrummintákat (2-5. Nap) hét olyan gyermekes anyától kaptuk, akinek később CMA alakult ki, és 22 egészséges gyermek édesanyjától. Az ismételt mérésekhez tartozó ANOVA az IgA becsült értékét (geometriai átlag) a 3. napon 0,38 g/l (95% CI, 0,24-0,82 g/l) biztosította azoknál az anyáknál, akiknél CMA alakult ki, és 0,82 g/l (95% CI) ). CI 0, 99–1, 51 g/l) azoknál az anyáknál, akiknek gyermeke egészséges maradt vagy infantilis kólika volt, de nem CMA (p 
Az összes IgA koncentrációja az egészséges csecsemő anyáinak tejében (nyitott körök) és azokban, akik tehéntej-allergiás csecsemővel (zárt négyzetek) rendelkeznek a laktáció időtartamának függvényében. A folytonos és szaggatott vonalak a modellezett geometriai átlagokat jelentik egészséges gyermekekben és CMA-ban szenvedő gyermekeknél. Mindkét csoport esetében külön modelleket alkalmaztak, amelyek jelentősen eltérnek egymástól.
Teljes méretű kép
Asztal teljes méretben
A tehéntej-specifikus IgA antitestek szintje a tejben korrelált az összes IgA-szinttel (r = 0,39; p
A tehéntej-specifikus IgA koncentrációja az egészséges csecsemő (nyitott gyűrűk) és a CMA-val (zárt négyzetek) rendelkező anyák tejében a szoptatás függvényében. A folytonos vonal a modellezett geometriai átmérőt képviseli. Mindkét csoportnál közös modellt alkalmaztak, mivel az IgA szintek összehasonlíthatók voltak a csoportokban.
Teljes méretű kép
A tehéntejre és az anyatejre specifikus összes IgA antitest szintje hasonló volt a kólikában, de CMA nélküli csecsemő anyákban (betegség kontrollcsoport), valamint egészséges csecsemőknél. A tehéntej elleni teljes és specifikus IgA antitestek emberi tejben lévő tartalma nem korrelált az anya atópiájával.
VITA
Amint azt ebben a tanulmányban megjegyeztük, az alacsony kolosztrum és humán IgA tej hajlamosíthatja az utódokat a CMA kialakulására. Megállapítottuk továbbá, hogy az emberi tej alacsony összes IgA-értéke nem az anya atópiájához kapcsolódott, hanem a gyermek allergiás állapotához.
A csecsemőknek allergiás reakciói lehetnek a kizárólagos szoptatás alatt (29). Felmerült, hogy ezeknél a csecsemőknél az ételre allergiás reakciókat az ápoló anyák által elfogyasztott kis mennyiségű fehérje átjutása okoz az emberi anyatejbe, és immunológiai módszerekkel kimutatható az emberi tejben (13, 27, 30). Valójában az étkezési fehérjék jelenléte az emberi tejben nem ritka. Például a tehéntejet fogyasztó anyák 75% -ának tejében találtak béta-laktoglobulint (30). Korábbi tanulmányok azonban kimutatták, hogy a tehéntejfehérjék vagy azok lebontott termékeinek a tejbe választott mennyisége nem kapcsolódik a CMA kialakulásához (14). Ez arra utal, hogy valószínűleg az emberi tejben lévő tehéntej antigének nem voltak az egyetlen tényezők, amelyek befolyásolták a csecsemő tehéntej allergiás tüneteinek kiváltását és fenntartását.
Számos tényező, például az sIgA, hozzájárul a bélantigének szabályozott beviteléhez a vékonybélből. Ezen tényezők közül sok az újszülött korában fejletlen. A jelentések szerint ezek az sIgA antitestek csak néhány hónapos intraluminális antigénstimuláció után jelennek meg a bélváladékban az sIgA-t termelő plazmasejtek helyi prekurzorával (31). Ezért nagyon valószínű, hogy a kisgyermekkorban előforduló relatív sIgA-hiány állapotában az idegen fehérjék könnyen hozzáférhetnek a szisztémás keringéshez (24). Az újszülöttek éretlen bélének ezt a tendenciáját, amely lehetővé teszi az idegen antigének túlzott bevitelét a nyálkahártya-gáton, kompenzálja a bélfelület passzív védelme, amelyet általában az emberi kolosztrum lenyelése biztosít (24). Az emberi tej számos tényezője megkönnyítheti a bélgát érését, miközben szekréciós antitesteket juttat a bél lumenjébe az idegen antigének eltávolítására a bél felszínén (32-34), ami valószínűleg csökkenti a szenzibilizáció kockázatát. A tej IgA-hiánya növelheti a bélnyálkahártya potenciális allergéneknek való kitettségét, és növelheti az ételallergia kockázatát.
Ebben a vizsgálatban az anyatej elleni összes IgA antitestszint a kolosztrumban volt a legmagasabb, 1–2 hét alatt gyorsan csökkent, és mindkét anyacsoportban több hónapig stabil maradt 0,2–0,3 g/l-nél. a korábbi vizsgálatokban talált értékekkel (13, 14). CMA-val rendelkező gyermekes anyáknál a csökkenés kevésbé volt kifejezett az alacsonyabb kiindulási értékek miatt. Az sIgA magasabb koncentrációja az emberi tejben a laktáció első heteiben megmagyarázhatja, hogy a legtöbb CMA-ban szenvedő gyermeknél miért nem jelentkeztek CMA-ra utaló tünetek 2–4 hetes korukig. Ebben a vizsgálatban több tejmintát nyertek, mint a szoptatás alatt azoktól az anyáktól, akiknél CMA alakult ki gyermekeknél, mint egészséges csecsemőknél. A modellezés során azonban ezt figyelembe vették.
Végül bemutatjuk a kolosztrum és az emberi IgA tej elleni antitestek védőhatását a csecsemők CMA kialakulása ellen. Ez összefüggésben lehet az idegen élelmiszer-antigének bélfelszínen történő kiválasztódásával. Az emberi tej alacsony IgA-értéke hajlamosíthatja az utódokat az ételallergia kialakulására.
rövidítések
tehéntej allergia
köszönöm
A szerzők köszönetet mondanak Dr. Kaisu Juntunen-Backman a létesítmények biztosításáért, Dr. Arja Hakulinen a betegek toborzásáért és mintavételéért, Hanna Oksanen pedig a statisztikai adatok elemzéséért. Köszönjük Marjo Leponieminek a kiváló technikai segítséget is.