C-vitamin beadása és hatása az emberi eritrociták kiválasztott jellemzőire

Szerzői: Juraj Krajčír1, Katarína Kučerová1, Jana Laceková1, RNDr. Terézia Kalnovičová, CSc.2, MUDr. RNDr. Angelika Púzserová, PhD.3, RNDr. Ľubomíra Tóthová, PhD.4, MUDr. Mgr. Drábek Rudolf5, orvos Jana Radošinská, PhD.5,6

1 Pozsonyi Comenius Egyetem Orvostudományi Kar
2 I. Pozsonyi Comenius Egyetem és az ENSZ Orvostudományi Kar Neurológiai Tanszéke
3 Pozsonyi Szlovák Tudományos Akadémia Normál és Kórélettani Intézete
4 Pozsonyi Comenius Egyetem Orvostudományi Kar Molekuláris Biomedicina Intézete
5 Pozsonyi Comenius Egyetem Orvostudományi Karának Élettani Intézete
6 SAS Szívkutató Intézet Pozsonyban

Bevezetés

Az eritrociták (vörösvérsejtek) alakváltoztatási képessége - deformálhatósága - fontos a mikrocirkuláció minősége és a szövetek megfelelő oxigénellátása szempontjából, mivel a 7,2 μm átmérőjű eritrocitáknak kb. Belső átmérőjű kapillárisokon kell átjutniuk. 3-4 μm. Ez a tulajdonság jelentősen befolyásolja a vörösvérsejtek életképességét, a véráramlást és a hemodinamikát. Általánosan elfogadott vélemény, hogy a teljes vér viszkozitása az eritrociták deformálhatóságától is függ. Az eritrocita deformálódásának csökkenése problémákat okozhat a szövetek vérellátásában, oxigénellátásában és következésképpen a szervek károsodásában (1).

A nitrogén-oxid (NO) termelése fontos tényező, amely befolyásolja az eritrociták deformabilitását. Ez a fontos értágító, amely kitágítja az ereket, nemcsak az érsejtekből áll, hanem magukból a vörösvérsejtekből is. A NO-termelés gátlása az eritrocita deformabilitás károsodásához vezet, amelyet az NO donorok normalizálnak (2).

A C-vitamin nélkülözhetetlen, vízben oldódó anyag, amely részt vesz a test prolin- és lizin-hidroxilezésében a kollagénben, a karnitin szintézisében, a tirozin anyagcseréjében, de mindenekelőtt nagyon fontos antioxidáns. Vannak olyan munkák, amelyek állatmodellekben figyelték meg a C-vitamin hatását az eritrocita deformabilitására. in vitro körülmények között (az élő test kivételével) (3, 4). Hatása az eritrocita deformabilitására és a vér hemorhológiájára emberben (in vivo körülmények között) nem ismert. Ennek következtében kísérletünkben a C-vitamin 3 hetes adagolásának az eritrocita deformabilitásra és az eritrocita NO termelésére gyakorolt ​​hatására összpontosítottunk, miközben egészséges fiatalok monitoroztuk az antioxidáns státusz és az oxidatív stressz kiválasztott paramétereit.

Anyag és módszerek

A vizsgálat résztvevői mind 20-33 éves nemi hallgatók voltak (n = 20), akik a kísérlet kezdetén és 3 hetes L-formájú C-vitamin (1000 mg/nap, NATURAL, sro, Szlovák Köztársaság). Teljes vért alkalmaztunk az eritrociták NO-termelésének meghatározására. A maradék vér (850 g, 10 perc, 4 ° C) centrifugálása után plazmát gyűjtöttünk az antioxidáns státusz és az oxidatív stressz kiválasztott paramétereinek biokémiai elemzéséhez. Az eritrocita pelletet háromszor sóoldattal mossuk, így tiszta vörösvértestek egy részét kapjuk, amelyeket deformabilitásuk mérésére használtunk.

Az oxidatív károsodás mértékét az oxidatív károsodás markereinek (TBARS, AGE, fruktozamin, AOPP) mérésével határoztuk meg. Ezeket a markereket növeli az oxidatív stressz, az oxidatív stressz olyan állapot, amelyben a prooxidáns-antioxidáns rendszer egyensúlya megszakad, az egyensúlyt a prooxidánsok javára döntve (a szabad gyökök relatív túlsúlya az antioxidáns kapacitás felett). Ismeretes, hogy az oxidatív stressz károsíthatja a biológiai struktúrákat, károsíthatja a lipideket, fehérjéket, szénhidrátokat és nukleinsavakat (beleértve a DNS-t is). A lipidperoxidáció markereit (tiobarbitursav-reaktív anyagok - TBARS) spektrofotometriásan mértük. Az előrehaladott glikációs végtermékeket (AGE) és a fruktozamint karbonil stressz markerekből határoztuk meg. A fejlett oxidációs fehérjetermékeket (AOPP) az oxidatív fehérjekárosodás markerként mértük. Az antioxidáns státusz információinak meghatározásához meghatároztuk a teljes antioxidáns kapacitást (TAC) és a plazma vas-redukáló antioxidáns hatalmat (FRAP). Minden mérést a korábban közzétett módon végeztünk (5).

Az eritrocita deformálhatóságát a szűrési módszerrel határoztuk meg, és az 5 µm-es szűrőn áthaladó eritrociták számának a szűrés előtti teljes eritrocita-szám arányaként mutatjuk be (6). Az eritrociták NO-termelését DAF-2 DA (diaminofluoreszcein-diacetát) fluoreszcencia szondával szemléltettük, és a fluoreszcencia jel mennyiségi meghatározását ImageJ-ben értékeltük (6).

Minden eredményt átlag ± szórásként adunk meg. Az adatok normalitását Shapiro-Wilk teszttel teszteltük. A C-vitamin beadása előtti és utáni adatok közötti különbségeket párosított t-teszttel elemeztük. A 0,05-nél kisebb p értékűeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.

A tanulmányt a Károly Egyetem Orvostudományi Kar és a Pozsonyi Egyetemi Kórház Etikai Bizottsága értékelte és hagyta jóvá 2016. február 15-én.

Az eredmények

Az eritrocita deformabilitása statisztikailag szignifikánsan megnőtt a 3 hét C-vitamin beadása után (1. ábra). Az eritrociták NO-termelésének mérésekor a C-vitamin növekedését is megfigyelték a C-vitamin beadása után (2. ábra). Az antioxidáns státus és az oxidatív stressz hat markere között csak a fruktozaminnal figyeltünk meg jelentős változásokat, amelyek plazmakoncentrációja megnőtt a C-vitamin beadása után.

c-vitamin

1. ábra: Az eritrocita deformabilitása. Statisztikai jelentőség: * p Kövessen minket
a társadalmi
facebook hálózat