Az anti-eritrocita antitestek szűrése és lehetséges specifikációja minden transzfúzió előtti vizsgálat része. A gyulladásos és autoimmun betegségben szenvedő betegeknél az alloimmunizáció kockázata háromszor nagyobb. Az alloantitestek azonosítását reumatológiai betegségekben gyakran bonyolítja az autoantitestek megtalálása, amelyek viszonylag gyakori laboratóriumi képükhöz tartoznak.
Etiológia
Az eritrocitaellenes antitestek azok az IgG és IgM osztályú immunglobulinok, ritkán IgA, amelyek bármely vörösvértest antigén ellen irányulnak. Jelenleg több mint 340 ismert közülük. Az antitestek természetes szabályosakra és immunosokra oszlanak. A természetes regulárisok immunizálás nélkül keletkeznek, IgM osztályok, ide tartoznak az AB0 rendszer antitestjei is. Azokat az antitesteket, amelyek csak immunizálás után keletkeznek (transzfúzióval vagy transzplantációval, terhesség alatt), szabálytalan immunnak nevezzük. Vannak IgG-osztályok, bár az IgM kezdetben az immunválasz korai szakaszában képződik. Az antitest funkciója az "idegen" eltávolítása a saját szervezetéből. Megkötött antitesttel a transzfúziós eritrociták megsemmisülése esetén intravaszkuláris vagy extravaszkuláris hemolízist okozó komplement aktiválást alkalmaznak, vagy monocyto-makrofág rendszer sejtjei által az eritrociták fagocitózisát, majd extravascularis hemolízist alkalmaznak.
Nem minden vörösvértest elleni antitest klinikailag releváns. Csak azokat tekintjük klinikailag szignifikánsnak, amelyek a megfelelő antigént hordozó transzfúziós eritrociták jelentős pusztulását okozzák (1. táblázat). Ide tartoznak - az anti-A, anti-B, anti-A, B mellett - azok az antitestek, amelyek indirekt antiglobulin-tesztben 37 ° C-on reagálnak (NAT), ezért a szűrés és azonosítás során a NAT-t használják (1).
Diagnosztika
Természetes anti-A, anti-B és anti-A, B antitestek az AB0 vércsoport-teszt részeként határozzák meg az A1 és B diagnosztikus eritrociták alkalmazásával. A kapott AB0-csoport helyes értelmezéséhez az eritrocita A és B antigéneket egyidejűleg teszteljük anti-A és anti-B monoklonális diagnosztikával (2. táblázat).
A szabálytalan antitestek kimutatása a beteg szérumában/plazmájában közvetett antiglobulin-szűrővizsgálatot alkalmaznak (1. ábra), legalább 3 diagnosztikus, meghatározott fenotípusú eritrocita felhasználásával. Az oszlopagglutináció (2. ábra) vagy a szilárd fázis (3. ábra) módszerét alkalmazzák - manuálisan vagy automatikus vérsejt-analizátorokon. A diagnosztikus vörösvértesteknek rendelkezniük kell a fenotípusban képviselt antigénekkel: C, Cw, c, D, E, e, K, k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, S, s, M, N, Le a; homozigóta ábrázolásban Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, S, s; legalább egy vörösvértest-szűrésnek van R1R1 (DCe/DCe) vagy R1w R1 fenotípusa és egy R2R2 (DcE/DcE) fenotípusa (Brguig). Ma ez a teszt az AB0 és RhD vércsoportvizsgálat és minden transzfúzió előtti vizsgálat szerves része (1, 7, 9).
Kép 2. ábra: NAT antitest szűrés - oszlop agglutináció (3). A mikrotubus gélmátrixot tartalmaz Coombs szérummal. A diagnosztikus vörösvértestek szuszpenzióját módosított LISS-oldatban (alacsony ionerősségű oldat) bizonyos koncentrációban adjuk a mikrotubulushoz, majd a beteg szérumát/plazmáját. 15 perc múlva. inkubálás 37 ° C-on és ezt követő centrifugálás, a reakció eredményét leolvassuk. Ha a szérum/plazma tartalmazza az antitestet, az eritrociták a megkötés után nem tudtak a gélmátrixon keresztül leszállni a mikrocső aljára a centrifugálás során, és a tetején maradhattak. Antitest hiányában diagnosztikus vörösvértestek rakódnak le a mikrocső alján. A reakció erejét levonjuk + -ra. Az eredmény: -, - /+, +, ++, +++, ++++.
Tervezett hemoterápia esetén antitest-szűrést adnak hozzá kompatibilitási teszt, amelyet ugyanazon módszerrel hajtanak végre, mint az ellenanyag-szűrést, és a transzfúziós vörösvértesteket és a beteg szérumát/plazmáját használják a reakcióban.
Ha a szűrési eredmény pozitív, antitest specifikáció legalább 8 diagnosztikus vörösvértestből álló panel ismert fenotípusú. Legalább egy diagnosztikus vörösvértest R1R1, R1 w R1, R2R2, r´r (Cde/cde) ar´´r (cde/cdE) fenotípusú, legalább kettőnek K, k, Fy a, Fy b antigénje van. Jk a, Jk b, S, s; legalább az egyik k fenotípusú, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, M, S, s homozigóta ábrázolásban; legalább háromnak van rr (cde/cde) fenotípusa és egyidejűleg egy K antigén és egyikük homozigóta ábrázolja k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, M, S, s. Ezt a panelt használják a beteg szérum/plazma reaktivitásának értékelésére NAT-ban és általában enzimvizsgálatban (7). Enzimek (bromelain, papain) képes módosítani azokat a fehérjéket, amelyek bizonyos eritrocita antigéneket hordoznak, így az antitesttel szembeni reaktivitásuk fokozódik vagy megszűnik. Ezen alapvető eljárások mellett másokat alkalmaznak az eritrocitaellenes antitestek keverékének meghatározására speciális technikák (4. táblázat) (5, 8). A szokásos gyakorlatban a leggyakrabban tesztelt alloantitestek az anti-M, anti-E, anti-c, anti-D, anti-C, anti-Le.
Posttranszfúziós hemolitikus reakciók
Ha a transzfúzió előtti teszt nem képes megkötni az antitestet (a teszt hibája miatt, nagyon gyenge reaktivitás vagy az antitest gyengülése miatt, amely a rendelkezésre álló módszertan kimutatási képességei alatt van), fennáll annak a veszélye, hogy - transzfúziós hemolitikus reakció inkompatibilis vér beadása esetén. Az akut hemolitikus transzfúzió utáni reakció drámai lefolyású, és általában az AB0 inkompatibilis vér beadása okozza adminisztratív hiba és a transzfúziós terápia beadására vonatkozó kötelező eljárás be nem tartása miatt. Másrészt a késleltetett hemolitikus transzfúziós reakciót gyakran olyan antitestek okozzák, amelyeket a transzfúzió előtti vizsgálat idején nem sikerült megragadni, és az emlékeztető emlékezet emlékeztető hatása az inkompatibilis kezelés beadása után néhány napon belül jelentkezik. vér. Ennek következménye egy alloantitest keletkezése, amely a transzfúziós eritrociták túlélésének jelentős megrövidülését idézi elő, a 10. táblázatban felsorolt klinikai tünetekkel együtt. 5. (2, 4).
A transzfúzió utáni reakció jeleinek észlelése esetén a hemoterápia, a klinikai vizsgálat és az alapvető orvosi eljárások azonnali leállítása mellett a lehető leghamarabb laboratóriumi vizsgálatokat kell végezni. A transzfúzió utáni reakció vizsgálatához a páciens vérére van szükség az ABO és RhD vércsoport eredményeinek, az antitest-szűrés és az összeférhetőség ellenőrzéséhez. Közvetlen antiglobulin-tesztet (PAT) adunk az ellenanyag transzfúziós eritrocitákhoz való kötődésének megerősítésére. Coombs (általában anti-IgG + C3d) szérumot adunk a páciensminta vörösvértestjeihez. Ha az antitest a transzfúziós eritrocitákhoz kötődik, a Coombs-szérum agglutinációt okoz. Ha a PAT pozitív, eluátumot készítünk. Specifikus fizikai-kémiai módszerek (jelenleg a leggyakrabban használt savas elúciós vizsgálat) felszabadítják az antitestet az eritrocitákból az eluátumba, amelyet ezután a páciens szérumához/plazmájához hasonló alloantitest azonosítására használnak. Ugyanakkor meg kell ismételni az összes vizsgálatot a vérbankba küldött eredeti mintából és a vérkészítmények transzfúziós zsákjaiból. Ha a transzfúzió előtt a PAT is pozitív volt a mintában, meg kell vizsgálni egy másik lehetséges okot (gyógyszerek, autoimmun folyamat stb.).
Ha hemolitikus transzfúziós reakció gyanúja merül fel, el kell végezni a beteg vérképét, beleértve a retikulocita számot, a kiindulási haemokoagulációt a disszeminált intravaszkuláris hemokoaguláció kizárására, valamint a hemolitikus folyamat és a veseelégtelenség jeleinek megerősítésére szolgáló biokémiai vér- és vizeletvizsgálatokat (1). . A transzfúzió utáni mellékhatások jelentését az alkalmazandó szlovák jogszabályokkal összhangban végzik (10).
Az alloimmunizáció kérdése meghaladja e cikk kereteit. Hangsúlyozni kell azonban, hogy a jelzett esetekben - azaz a politranszfúziós kezelés szempontjából, transzplantációs programban, ismert alloantitesttel rendelkező betegeknél és autoimmun haemolyticus anaemia esetén - a beteg teljes eritrocita fenotípusának vizsgálata és az ABO minimális adagolása, Rh és K-kompatibilis vörösvértest transzfúziós termékek.
Következtetés
Megfelelő és érzékeny módszerrel végzett megfelelő transzfúzió előtti immunhematológiai vizsgálat döntő fontosságú a transzfúzió utáni hemolitikus reakciók megelőzésében. A politranszfúzióban szenvedő betegeknél az alloimmunizáció kockázata nő, ezért egyes diagnózisok kapcsán megfelelő a teljes eritrocita fenotípus vizsgálatának kérdése a hemoterápia megkezdése előtt.